怎么做细菌培养? 根据培养细菌的目的和培养物的特性培养方法分为一般培养法,二氧化碳培养法和厌氧培养法三种.1.一般培养法 将已接种过的培养基,置37℃培养箱内18-24小时,需氧菌和兼性厌氧菌即可于培养基上生长.少数生长缓慢的细菌,需培养3-7天直至一个月才能生长.为使培养箱内保持一定湿度,可在其内放置一杯水.培养时间较长的培养基,接种后应将试管口塞棉塞后用石腊凡士林封固,以防培养基干裂.2.二氧化碳培养法 某些细菌,如牛流产布氏杆菌和胎儿弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空气中才能生长,尤其是初代分离培养要求更为严格.将已接种的培养基置于二氧化碳环境中进行培养的方法即二氧化碳培养法,常用方法有以下几种:(1)二氧化碳培养箱 可将已接种的培养基直接放入箱内孵育,即可获得二氧化碳环境.(2)烛缸法 将已接种的培养基,置于容量为2 000ml的磨口标本缸或干燥器内.缸盖或缸口处均需涂以凡士林,然后点燃蜡烛直立置入缸中,密封缸盖.待燃自行熄灭时,容器内约含5-10%的CO2 容器置37℃培养.(3)重碳酸钠-盐酸法 每升容积的容器内,重碳酸钠与盐酸按0.4g与3.5ml的比例,分别将两种药各置一器皿内(如平皿内),连同器皿置于标本缸或干燥器内,盖严后使容器倾斜,两种药品接触后即可。卡那霉素培养基的作用是什么?野生型和转基因拟南芥在上面的表现有何不同 拟南芥是一种模式植物,多年来围绕拟南芥的相关研究很多,尤其是对于拟南芥转基因研究非常热门,相关的论文也有很多.原因主要有以下几个方面:1 拟南芥是一种模式植物,基因组小,克隆其基因比较简单.2 种植方便,条件易得.3 拟南芥是自花传粉植物,这样既很容易进行遗传分析.4 方法简单,不同于传统的植物转基因,不需要植物组织培养阶段,对于实验操作的要求不是很高.当前拟南芥转基因所使用的方法主要是农杆菌介导的转化(载体法),区别主要是转化的方法不同,有抽真空,花序浸染和喷雾法使用最为广泛.1农杆菌介导转化的基本流程编辑农杆菌(目标载体)液的制备↘拟南芥种植→花期(侵染)→共培养→收种→验证2农杆菌制备编辑1)从-80℃冰箱中取出lml农杆菌.2)LB培养基中添加50mg/L的卡那霉素(Kan)和100mg/L的利福平(Rif).3)把lml农杆菌加入到含有Kan和Rif抗生素的LB培养基中,28℃振荡10h.4)拟南芥转基因浸润液采用的是1/2MS,加蔗糖50g/L,PH值调至5.7.然后在15p压力下蒸汽灭菌15min,灭菌结束,冷却后保存于4℃,以待转基因使用.3转化编辑抽真空/花序浸染/喷雾法其中抽真空法转化效率最高,但是步骤麻烦,而且要将拟南芥倒置浸染到菌液中,操作不方便.喷雾法相比来说简便易。
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