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紫外分光光度法测不准 紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同

2020-07-22知识9

紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同:(1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。(2)可见分光光度计采用低杂散光,高分辨率的单光束单色器,保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰,所以可用紫外分光。紫外分光光度法对照法中要不要用空白对照? 当然要用空白了,不过不是为了画标准曲线,空白做参比是为了调节机器的吸光度为零的点.因为溶剂和比色皿都会有反光的作用.溶剂一定程度上也会吸光.紫外分光光度法优缺点 优点是1灵敏度高2仪器设备简单,操作简便、快速3应用广泛缺点是准确度相对不高紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点? 1、原理不同:(1)紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。(2)荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同:(1)紫外分光光度计主要用于实验室。例如:e799bee5baa6e997aee7ad94e59b9ee7ad9431333431363562鉴定物质:根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。与标准物及标准图谱对照等。(2)荧光分光光度法的灵敏度通常比分光光度法高2?3个数量级。在卫生检验、环境及食品分析、药物分析、生化和临床检测等方面有着广泛的应用。3、所用灯不同:(1)紫外光区通常用氢灯或氘灯。(2)荧光分光光度法通常用钨灯或卤钨灯。4、优缺点:(1)紫外分光光度计高自动化程度,维护方便、操作简便、效率高。(2)荧光分光光度法具有检测灵敏度高、专属性较强和使用简便等特点,常用于微量甚至痕量毒物的定量分析。扩展资料紫外-可见分光光度计的结构与功能:由光源、单色器、吸收池、检测器。影响紫外分光光度法测定准确性的因素有哪些 1.仪器是否工作正常(光源灯老化,电压不稳定,集成电路板、显示器有来毛病,波长调节器有毛病等等)2.标准溶液浓度是否准确3.所用方法是否合理(你选用的标准方法是否符合你要测定的对象—被测定浓度范围,干扰情况,赋存状态等等)4.所用试剂是否符合要求(纯度、干扰情况)5.所用量器(天平、容量瓶、移液管等)是否存在系统误差6.配置显色过程是否误操作(加入试剂顺序、加入量等)7.显色时间源、显色温度是否符合要求8.样品槽是否洁净9.测试吸光度范围是否在0.2-0.8之间除此之外,数据处理也会带来误差。最好采用标准系列法,平行多次测定,计算机程序绘图,计算机计算每侧测定结果并求出平均值,按误差理论对数据进行处理,最后给出结果。zd紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光度法的2113特点52611、与其它光谱分析方法相比,紫外可见4102分光光度法事物仪1653器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。二、紫外可见分光光度法的适用范围紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面,在许多领域更是必备的分析方法,例如食品等行业中的产品质量控制。扩展资料紫外可见分光光度法的注意点:1、准备操作仪器前,需要先查看一下指针仪器在断电的情况下,表面指针是否指向零刻度。如若不是,理应先调零然后才能连接电源。2、在使用的过程中,操作员应该尽量避免对镜灯的触碰,放大器使用过后,一定需要把档位归置到零。3、在操作紫外可见分光光度计时,操作人员需要留意一下机器的干燥剂。4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。参考资料来源:-紫外-可见分光光度法用紫外分光光度法测定核酸有什么缺点 核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统(-C=C一C=C 一),能够强烈吸收250~280nm 波长的紫外光.核酸(DNA,RNA)的最大紫外吸收值在260nm 。紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点受哪些因素的影响和限制 紫2113外分光光度法测定蛋白质含量的方法有5261何优缺点?受4102哪些因素的影响和限1653制?答:优点是:方法简单、灵敏、快速、高选择性,且稳定性好,不消耗样品,低浓度的盐类不干扰测定。缺点是:仪器昂贵,而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的,测定结果存在着一定的误差,受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介质溶液等因素的影响和限制。

#吸收光谱#分光光度法

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