使用紫外可见分光光度计测蛋白质结构的原理是什么?如果出现负值是什么原因呢?(PS:已测过基线) 紫外可见分光光度计原理

紫外可见分光光度计的主要操作原理是什么？ 透明液体的颜色由所吸收（透过）的光的波长和吸收量的不同而显示不同的颜色和深度，通过检测一定厚度该溶液的吸收波长和吸收量，可以判断溶液中电解质的种类和浓度。紫外可见分光光度计可以在可见光和紫外光光谱之间工作，发射器定强度、定波长发射出的光线在通过等厚度的玻璃皿后，接收器所接收到的强度会有所减弱，通过计算减弱的比例，可以判定溶液的浓度；而通过连续波谱吸收扫描可以大致判断玻璃皿中的溶液的最大特征吸收波长，从而大致判断溶液中可能含有的物质的特征。可见分光光度计与紫外分光光度计有什么区别？以及各种部件的区别？ 可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右，紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样，紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。正式由于这段紫外光的区别，就决定了他们的仪器结构部件有一些不同了，他们的不同之处主要在于以下几个地方：1、光源不同：可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源，同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样，紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。2、光学器件的不同：由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用石英光学部件。同时由于这个原因，在比色皿的选择上也就有不同了，可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿，而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。3、接收器的不同：由于紫外可见分光光度计多了紫外波，所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的。紫外-可见光分光光度计 原理，基本构造，使用方法，注意事项及应用 一、分光光度计的基本工作原理随着现代科技的不断发展和进步，现代分光光度法的测试手段和方法都在不断改进，但最根本的依据仍然建立在朗伯-比尔定律的基础之上。A=KLC式中：A-为被测物在给定波长的需光吸光度值K-为一系数，称为溶液的吸收系数（与入射光波长及被测物质的特性有关）L-为被测物质的厚度（一般与比色池的厚度有关）C-为被测物质的浓度由上式可以看出，被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比。实际测试时，单色光通过被测物质达到光电接收器，由光电倍增管或光电池转换成光电流，而光电流的强弱决定了吸光度值A的大小。假定通过参比样品的光电流为I。而通过待测样品的光电流为I，则两者之比设定为τ，也称透射比（或以T%表示，称为透过率）。则：τ=I/I。100%朗伯-比尔定律的贡献就是发现了透射比的负对数值（也就是吸光度A）的变化与物质的浓度的变化呈正比关系。即：A=-lgτ或lg（I/I。KCL同时，不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值，这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。基于上述原理，你可以知道无论以往的仪器还是现代的仪器，其最基本的工作要求就是为了能准确获得物质（或称样品）。紫外可见分光光度计定性原理是什么？ 紫外可见分光光度计定性原理 由于不同的物质对不同波长光有不同的吸收度，其吸收曲线形状和最大吸收波长λmax不同；但同一种物质即使浓度不同，其吸收曲线形状仍相λmax。紫外可见分光光度计简单介绍原理及应用 【导读】自从1918年紫外可见分光光度计由美国研发出来之后，经过长期的不断发展和进步，像自动记录、打印等相关辅助性仪器已经诞生了。紫外可见分光光度计法诞生后，给我们的生活与工作带来了不小的冲击，它的功能能够更好的为我们服务。那么它的原理还有一些具体的应用是怎样的呢？下面就让小编来为大家介绍一下。紫外可见分光光度计的原理其实相对比较简单，我们都知道就是物质在吸收光谱之后，其本身的含义就是物质里面的分子以及原子有了一定波长光能量。在这些能量的基础上出现分子振动的能级跃迁以及电子能级跃迁这样的效果。每一个物质的分子是不一样的，它们的组成也是相差很大。这样一来物质所吸收的光能量也就有很大的差距，于是就会有了不一样的波长，从而分析出物质的特点以及相互的关系。相对于紫外可见分光光度计的应用来说，主要有以下几个方面。首先这类设备在物质检定方面的贡献是不小的，我们依据光谱图所展示的相关特点进行分门别类的吸收，尤其是最大的吸收波长。这种设备具有的功能在药物的常规分析方面的应用是很重要的。通过了解我们知道国内外药典里面，早就已经把相当一批药物的紫外吸收光谱参数都记录在里面了。这样的记录为药品的分析提供。最低0.27元/天开通文库会员，可在文库查看完整内容>；原发布者：wheatchem紫外可见分光光度计原理及操作潘睿睿目录紫外-可见分光光度计仪器原理1紫外-可见分光光度计结构及类型23UV-Vis分光光度法的应用和分析条件的选择4UV-Vis分光光度计的保养与故障处理一、紫外-可见分光光度计仪器原理原理波长2004008003200(nm)g-X-射线紫外可见红外微波无线电真空紫外近红外核磁共振波长越短，能量越高原理1）分子吸收光谱的形成过程：运动的分子外层电子-吸收外来外来辐射-产生电子能级跃迁-分子吸收谱。2）由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。3）紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)。朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，俗称光吸收定律，是分光光度法定量分析的依据和基础。朗伯-比耳定律一、透射率T%透射光I入射光I0光程长bI透射率T%×100%I0朗伯-比耳定律当入射光波长一定时，待测溶液的吸光度A与其浓度和液层厚度成正比，即Akbck为比例。使用紫外可见分光光度计测蛋白质结构的原理是什么？如果出现负值是什么原因呢？(PS：已测过基线) 紫外可见分光光度计测定的是蛋白浓度，X射线晶体衍射测的才是蛋白质结构.紫外分光光度计测蛋白浓度原理：组成蛋白质的氨基酸里，有三种氨基酸：苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸具有苯环的共轭结构，它们对特定波长的紫外线具有吸收光谱，也就是说：它们对紫外线是有颜色的.每种蛋白质根据苯环的数量和分布都有一定的吸收强度，总的吸收值和分子的浓度呈正比.根据蛋白质溶液对280nm紫外线的吸收强度，可以测定出蛋白质的浓度.X射线晶体衍射测蛋白结构原理：蛋白质的肽链不是杂乱无章的，按照一定的规则盘曲成了特定的形状(蛋白质高级结构)，每个碳-碳键都有它特定的构象，这种特定的结构是蛋白质作为分子机器的基础.结晶的蛋白质中，分子排成了空间重复的有序的结构，而原子之间的间隙与X射线的波长类似，构成了X射线的衍射光栅.当用X射线照射这种重复性的天然光栅时，通过波的衍射形成了有规则的干涉条纹，分析这些条纹就可以解析出蛋白质分子中每个原子的位置.

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