紫外分光光度计测量喹啉 喹啉黄的含量分析

常用来测定蛋白质含量的方法有哪些？优缺点是什么？ 1、凯氏定氮法凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。优点：可用于所有食品的蛋白质分析中；操作相对比较简单；实验费用较低；结果准确，是一种测定蛋白质的经典方法；用改进方法（微量凯氏定氮法）可测定样品中微量的蛋白质。缺点：凯氏定氮法只是一个氧化还原反应，把低价氮氧化并转为氨盐来测定，而不能把高价氮还原为氮盐的形式，所以不可以测出物质中所有价态的氮含量。2、双缩脲法双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10mg。优点：测定速度较快，干扰物质少，不同蛋白质产生的颜色深浅相近。。碱溶性蛋白测定方法及计算公式 ①凯氏定氮 原理：蛋白质平均含氮量16%品与浓硫酸共热蛋白氮转化铵盐强碱性条件氨蒸用加指示剂硼酸吸收用标准酸滴定硼酸通标准酸用量即求蛋白质含氮量蛋白质含量 ②双缩脲 原理：尿素180℃脱氨双缩脲碱性溶液双缩脲与Cu2+形稳定紫红色络合物蛋白质肽键实际酰胺键故肽、蛋白质等都双缩脲（biuret）反应产蓝色或紫色复合物比色定蛋白质含量 缺点：灵敏度低品必须溶量糖类共存含脯氨酸肽显色其 精确度 较差(数mg)且受品 硫酸铵 及 Tris 干扰 准确度 较高受蛋白质种类影响 ③Folin酚(Lowry)Folin酚biuret 延伸所用试剂由试剂甲乙两部组试剂甲相于双缩脲试剂（碱性铜试剂）试剂乙含磷钼酸磷钨酸 碱性条件蛋白质巯基酚基等Cu2+原Cu+Cu+能定量与Folin－酚试剂反应蓝色物质600nm比色测定蛋白质含量 灵敏度较高(约 0.1 mg)较麻烦受 硫酸铵 及 硫醇化合物 干扰 步骤各项试剂混合要特别注意均匀澈底否则误差 ④紫外 280nm光吸收：利用Tyr280nm吸收进行测定 280nm-260nm吸收差：若品液少量核酸共存按式计算：蛋白质浓度(mg/ml)=1.24E280-0.74E260（280 260角标）⑤色素结合（Bradford）直接测定：利用蛋白质与色素（Coomassie Brilliant Blue G-250）结合物光吸收用光光度进行测。dna纯度浓度测定时，为什么测230nm处的od 除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如 A 260/A 280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品，比值大于 1.8（DNA）或者2.0（RNA）.如果比值低于 1.8 或者2.喹啉黄的含量分析 喹啉黄含量的测定方法有分光光度比色法、高效液相色谱法、色谱积分仪。1、方法提要将喹啉黄试样用磷酸盐缓冲溶液(pH为7)溶解，稀释定容后，在最大吸收波长处，测其吸光度值计算其含量。2、样液配制称取喹啉黄试样约0.25g(精确到0.0001g)，溶于适量磷酸盐缓冲溶液中，移入1000mL容量瓶中，加磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀。吸取10mL，移入250mL容量瓶中，用磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，备用。3、分析步骤将喹啉黄试样溶液置于10mm比色皿中，同在最大吸收波长处用分光光度计测定其吸光度值，用磷酸盐缓冲溶液作参比液。喹啉黄含量为W1计，用%表示，按下式计算：W1=（A·f·1000）/（a·m）×100%式中：A：喹啉黄试样溶液的吸光度值；f：喹啉黄试样溶液的稀释因子；a为喹啉黄的吸光系数，86.5；m：试样质量，g。计算结果表示到小数点后两位。平行测定结果的绝对差值不大于1.O%，取其算术平均值作为测定结果。1、方法提要本方法用于由2-(2一喹啉基)-1，3-茚二酮磺化而制得的喹啉黄，用峰面积归一化法测定2-(2一喹啉基)-茚满基-1，3-二酮二磺酸二钠盐、2-(2-喹啉基)-茚满基-1，3-二酮单磺酸钠盐和2-(2-喹啉基)-茚满基-1，3-二酮三磺酸三钠盐的含量。2、试剂材料。如何选择有机肥料中全磷最合理的测定方法 合理有效检测有机肥料中的全磷含量636f7079e79fa5e9819331333363356563摘 要 分光光度法测定有机肥全磷含量只适用于含量不超过6mg的产品，目前有些有机肥添加了无机肥的成分（加入磷酸铵、过磷酸钙等），再用分光光度法检测其含量，结果会偏低。而用磷钼酸喹啉重量法，结合分光光度计法中的样品处理步骤，再用37.5%EDTA溶液提取枸溶性磷，有效五氧化二磷便能合理地检测出来。关键词 全磷 分光光度法 消煮 磷钼酸喹啉 枸溶性磷农业行业标准NY 525-2002《有机肥料》规定，有机肥料全磷的测定采用硫酸和过氧化氢消煮，在一定酸度下，待测液中的磷酸根离子与偏钒酸和偏钼酸反应生成三元杂多酸。在一定浓度范围内，黄色溶液的吸光度与含磷量呈正比例关系，用分光光度计在波长420mm处测吸光度，根据标准曲线或直线回归方程求出全磷含量（钒钼酸铵分光光度法）。这种方法用于测定粪类等单一的有机肥中全磷含量较为准确。因为，这些单一有机肥磷含量较低，提取液含磷一般不超过6mg，枸溶性磷含量更少，分光光度法适用于低含量磷的测定，并较为快速。其计算公式为：式中：M—样品质量；C—由校准曲线查得显色液磷浓度；V—显色体积；D—分取倍数、定容体积/分取体积；2.29。不同的细菌都是测定OD600nm吗 不同的细菌都是测定OD600nm实验室确定细菌生长密度和生长期，多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验，需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液，之后定量培养后的含菌培养液。2、OD值的名词解释与测量方法的实现2.1 OD值名词定义：OD是optical density（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，是检测方法里的专有名词，检测单位用OD值表示，1OD=log10（1/trans），其中trans为检测物的透光率T值。光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。2.2 测量方法的实现：知道的测量原理就是用分光光度计来实现，包括可见和紫外分光光度计都可以，因为波长是在600nm，市面上所有的分光光度计都可以满足要求，但根据实验者对测量数据的精度和准确度的要求可以选择不同档次的光度计来实现。也有部分厂家的光度计直接支持OD600，例如天美的UV1100。如果是普通的分光光度计我们也可以实现OD600的测定，第一步在仪器的光度计模式中，先把波长走到600nm；第二步放入我们的空白样品，进行调零。山东大学649药学综合真题2015年考研 （一）化学分析1.绪论【基本内容】可以同其他同学交流下羣三一三五四三八九六四本章内容包括分析化学的任务和作用；分析化学的发展；分析化学的方法分类（定性分析、定量分析、结构分析和形态分析；无机分析和有机分析；化学分析和仪器分析；常量、半微量、微量和超微量分析；常量组分、微量组分和痕量组分分析）；分析过程和步骤（明确任务、制订计划、取样、试样制备、分析测定、结果计算和表达）；分析化学的学习方法。2.误差和分析数据处理院【基本内容】本章内容包括与误差有关的基本概念：准确度与误差，精密度与偏差，系统误差与偶然误差；误差的传递和提高分析结果准确度的方法；有效数字及其运算法则；基本统计概念：偶然误差的正态分布和t分布，平均值的精密度和置信区间，显著性检验（t检验和F检验），可疑数据的取舍；相关与回归。3.滴定分析法概论【基本内容】本章内容包括滴定分析的基本概念和基本计算；滴定分析的特点，滴定曲线，指示剂，滴定误差和林邦误差计算公式，滴定分析中的化学计量关系，与标准溶液的浓度和滴定度有关的计算，待测物质的质量和质量分数的计算；各种滴定方式及其适用条件；标准溶液和基准物质；水溶液中弱酸（碱）各型体的分布和。怎样测试自制樱桃酒中黄曲霉素？ 黄曲霉素（AF)的检测方法从最初以薄层层析法为主，发展到高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法等多种方法普遍应用，其进展与新的化学检测手段和新仪器的出现密不可分。这些新方法、新手段的快速应用，为黄曲霉毒素的检测提供了更广泛的选择余地，适应了不同的检测目的和要求。薄层层析法薄层层析法（TLC）是测定AF的经典方法，其原理是将样品经过提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后，在波长365nm紫外光下产生蓝紫色或黄绿色荧光，并根据其在薄层上显示的最低检出量来确定其含量。高效液相色谱法HPLC具有高分辨率，分析时间较短等优点。它的原理是样品溶液中欲分离的几种化合物在流动相和固定相之间有不同的分配量，从而达到分离的目的。AF经柱后电化学衍生化后，能发射特征性荧光，被荧光检测器捕获后而得到检测，最后经化学工作站处理数据。这一检测方法，将化学分析试验与领先的计算机技术结合，使自动化程度得到极大的提高，在试验空间、人力和仪器都保持不变的情况下，能检测更多的样品。HPLC是近几年发展起来的检测AFB1的方法，主要是用荧光检测器检测。该法快速而准确，但需要昂贵的仪器设备，未能广泛使用。微柱法微柱法测定AF，是利用微柱管内的。分光光度计测银离子的标准曲线 建议：1.首先预估待测样品的银离子浓度；2.使用外标法，应用相关定量化学分析仪器和操作，配制系列的与待测样品浓度接近的银离子溶液（如硝酸银）3.分光光度计测定系列的银离子溶液，参考朗伯比尔定律，绘制标准曲线。使用origin软件拟合。4.重复三次，得到标准曲线。5.测定待测样品，根据标准曲线推断浓度。补充回答一下，如图，横轴可以是浓度，纵轴是吸光度，做五组实验，得到拟合好的直线，再做你要测的样品，把点画在图上，读出浓度即可。向左转|向右转紫外可见分光光度法中，两组份以上的多组分样品为什么难以测定？ 引言在实验室条件下，为了研究厌氧水解—酸化工艺预处理焦化废水的效果，选取实际焦化废水中含量最高的苯酚和３种典型的难降解物质喹啉、吡啶、吲哚来模拟焦化废水。分析。

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