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紫外可见分光光度法误差产生 紫外可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么?

2020-10-19知识27

分光光度法和紫外分光光度法有何区别?

紫外可见分光光度法误差产生 紫外可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么?

紫外可见分光光度法 此方法的原理是根据被测物对特定波长处光吸收的多少来计算其浓度(含量)的,使用前需要教正仪器,避免测量是产生误差.当盖上盖子时,样池中没有样品,所以光应该是完全透过到达另一端被接收,其能量没有减失,所以仪器应该显示100%,当盖子打开时光就不能到达接收端,所以仪器应该显示0

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紫外可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;T为透光率;E为吸收系数,采用的表示方法是(E1%1cm),其物理意义为当溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。在给定波长,溶剂和温度等条件下,吸光物质在单位浓度,单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。当c的单位为g/L,b的单位为cm时,则A=abc,比例系数a称为吸收系数,单位为L/g.cm-1;当c的单位为mol/L,b的单位为cm时,则A=εbc,比例系数ε称为摩尔吸收系数,单位为L/mol.cm-1,数值上ε等于a与吸光物质的摩尔质量的乘积。它的物理意义是:当吸光物质的浓度为1mol/L,吸收池厚为1cm,以一定波长的光通过时,所引起的吸光度值A。ε值取决于入射光的波长和吸光物质的吸光特性,亦受溶剂和温度的影响。显然,显色反应产物的ε值愈大,基于该显色反应的光度测定法的灵敏度就愈高。扩展资料:紫外分光光度法是根据物质分子对波长为200nm-400nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重视性好。波长长(频率小。

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紫外可见分光光度法测核酸含量的误差来源是什么?如何排除 误差可能是由于蛋白质污染或者是其他试剂残留所引起的.A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品,A320一般是0.

紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量? 根据朗2113伯比尔定律得出:当一束平行5261单色光通过一定液层厚度的有色溶4102液时,由于溶质吸收了1653光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多。如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。于是,我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)故m2=(A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。扩展资料:在分光光度分析中,比尔定律是一个有限的定律,其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等,无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射;入射光为单色平行光。导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多,但基本上可分为物理和化学两个方面。物理方面主要是入射光的单色。

紫外可见分光光度法 此方法的原理是根据被测物对特定波长处光吸收的多少来计算其浓度(含量)的,使用前需要教正仪器,避免测量是产生误差。当盖上盖子时,样池中没有样品,所以光应该是完全透过到达另一端被接收,其能量没有减失,所以仪器应该显示100%,当盖子打开时光就不能到达接收端,所以仪器应该显示0

紫外分光光度法测定氯霉素含量实验中引起误差的原因是什么

紫外可见分光光度计的用途是什么 用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。截止阀可在600nm测定细菌细胞密度。(2)紫外可见分光光度计紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。它们的用途又有区别。单光束:适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有很高的稳定性。双光束:自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。仪器复杂,价格较高。假双光束也就是比例双光束,它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束,一束直接到达检测器,另一束通过样品后到达另一个检测器。电热带这种仪器的优点是可以监测光源变化带来的误差,但是并不能消除参比造成的影响。(3)红外分光光度计一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物最常用的光谱区域,能分析各种状态(气、液、固)的试样。红外光谱法的特点是:快速、样品量少(几微克-几毫克),特征性强(各种物质有其特定的。

在紫外可见分光光度法的定量分析中误差来源有几个方面?如何避免? 紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握:本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法;分子吸收光谱与电子跃迁类型,物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线,摩尔吸收系数与吸收系数,吸光度与透光度,偏离朗伯-比尔定律的原因;掌握显色反应条件及光度测量条件的选择;掌握紫外—可见分光光度计的主要部件,各部件的作用及仪器原理,主要类型及特点;掌握差示分光光度法的原理、特点.理物质分子结构与紫外吸收光谱的关系,吸收波长位移与分子结构变化的关系;紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素.了了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径;双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法;紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用.二、基本概念与重点内容A概述1.紫外—可见分光光度法的特点灵敏度与准确度较高;选择性较好;设备简单、操作简便.2.分光光度法的发展过程目视比色法 光电比色法 分光光度法3.分子的紫外—可见吸收光谱分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光,其外层电子跃迁而成,又称分子的电子跃迁光谱.紫外—可见分光光度法是基于物质分子的。

紫外分光光度计与紫外可见分光光度计的区别是什么? 紫外2113分光光度计与紫外可见分光光度计的区别:52611、测量4102的范围不同:(1)紫外分1653光光度计量程为200nm~600nm间(包括部分可见光)。(2)紫外可见分光光度计量程为200nm~1000nm。2、所用灯不同:(1)紫外光区通常用氢灯或氘灯。(2)见光区通常用钨灯或卤钨灯。3、原理不同:(1)紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。(2)紫外-可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。扩展资料紫外-可见分光光度计的结构与功能:由光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示系统五大部分组成。(1)光源:是提供符合要求的入射光的装置,有热辐射光源和气体放电光源两类。热辐射光源用于可见光区,一般为钨灯和卤钨灯,波长范围是350~1000nm;气体放电光源用于紫外光区,一般为氢灯和氘灯,连续波长范围是180~360nm。(2)单色器:功能是将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束,它是分光光度计的心脏部分。(3)吸收池:又称比色皿,供盛放试液进行吸光度测量之用,其底及两侧为毛玻璃,另两面为光学透光面,为减少光。

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