产蛋白酶菌株的筛选除了常用的透明圈法，还有哪些？需要搜集各种筛选方法。我查了很多文献，大都是水解圈法的，我想了解产蛋白酶菌株的筛选方法，分离方法，酸性，中性，碱性的，都可以说说看的。
从土壤中分离纯化碱性蛋白酶牙孢杆菌的步骤是什么 该菌的最适产酶时间为48-60h，最适产酶pH位为11．0，最适产酶温度为30-35℃．该菌对氨苄青霉素和硫酸链霉素敏感，而对壮观霉素有抗性 分离可用调节pH值，温度以及用。
已分离到一株产碱性蛋白酶的菌株，如何获得其基因 请问楼主现在有答案了吗？同求。我有个思路不知道行不行，用cDNA文库，构建好之后，酶切，与载体连接，加上标记，再导入受体细胞，找到表达的受体细胞，根据标记再获得相应基因片段。我学的不大好，没具体想步骤，也不知道这样行不行。
如何分离产生碱性蛋白酶的芽孢杆菌 一.先配制以蛋白质为唯一氮源和碳源的固体琼脂培养基.二.（首先要明白两点：1、—NH2能够水解，与H2O反应生成—NH3＋和OH－，从而显示出碱性；2、—COOH能够电离，在水中生成—COO－和H＋，从而显示出酸性；3、氨基酸分之上，必须至少带有一个—COOH和一个—NH2明白以上几点就能够判断了要使其能够带正电，水解和电离后，总的来说氨基酸上的—NH3＋要多于—COO－，而生成一个—NH3＋就要得到一个OH－，生成一个—COO－就要得到一个H＋，因此得到的OH－要比H+多，因而显示出碱性；相反，要是带负电的话，那么就显示出酸性.）三.由上可知加入酚酞（或石蕊）等酸碱指示剂.四.加入土壤浸出液，出现红色圈的为蛋白质水解酶产生菌.五.用平板划线法或稀释涂布平板法分离纯化，即可得较纯种目的菌株.
产生蛋白酶的微生物 分离 本论文主要研究了以大豆废渣为原料制备风味良好的大豆多肽的问题.摒弃了常规的酸法、碱法和一般的酶解方法，采用自行选育的微生物蛋白酶结合木瓜蛋白酶和胰蛋白酶多酶协同作用，制备水解度高、风味良好的大豆多肽.实验从我国传统发酵食品豆腐乳出发，筛选到一株所产微生物蛋白酶对大豆蛋白有一定降解能力，同时能够消除内切酶水解大豆蛋白后产生不良风味的菌株，命名为MY10.对MY10进行了初步鉴定，发现其为毛霉属.研究了菌体生长和产酶特性的关系，发现该菌株在液体培养基中84h时达到最大，培养基的pH值在0～48h不断下降，48h时pH值为4.2，之后pH值开始回升，84h后为7.0以上，通过测定蛋白酶活性，发现MY10所产蛋白酶在84h活性达到最大；对粗酶液进行了分离纯化，首先确定了用60%的饱和(NH_4)_2SO_4进行沉淀，然后过Sephadex G75，通过蛋白酶活性的测定，发现可能含有中性蛋白酶和碱性蛋白酶；对粗酶液性质进行了研究，发现该酶系的最适pH值为9.2，中性、碱性蛋白酶的最适温度分别为60℃、50℃.由于该酶系的蛋白酶活性不是很高，为了提高豆粕的水解度，得到水解程度较高的大豆多肽，本论文选用木瓜蛋.英文摘要：The problem of producing flavorful polypeptides from soybean residue was discussed 。
要获得生产用于洗涤剂的碱性蛋白酶的菌种，应怎么做 碱性纤维素酶产生菌的筛选与培养条件研究 碱性纤维酶的研究比较晚，但发展得很快。日本学者对碱性纤维素酶进行了大量的研究。1970年，UNILIVER公司首先发现纤维素酶用于。
为什么分离与纯化胃蛋白酶要用碱性溶液？ 蛋白质学有个概念叫做“等电点”，等电点是一个pH值，在此pH值时蛋白质溶液的静电荷为0。注意等电点与“最适宜作用的pH值”数值相近，但并不是一个概念。蛋白质有一个性质就是在pH值远离等电点的溶液中，溶解度较高，接近等电点的溶液中溶解度低（当然要在一定范围内）。所以在分离纯化蛋白时，抽提液的pH值要远离目的蛋白的等电点，这样才能溶解更多的目的蛋白，提高抽提效率。又为了避免强酸强碱环境，所以酸性蛋白要用碱性溶剂，碱性蛋白要用酸性溶剂。对于胃蛋白酶，其适宜作用环境是较强酸性，所以它的等电点是pH的（约等于2），是酸性蛋白，要用碱性溶液。有朋友回答“防止自降解”是不对的。因为胃液就是强酸环境，如果能发生自降解，在胃里面早就发生了。在消化食物之前，消化酶就把自己消化了，这是不可能的。胃蛋白酶不具有自己能够识别和降解的区域，也就是说不会自己降解自己。最后说一句，在一定的条件范围内，即使酶失活，也是可以通过改变条件而恢复活性的=)诺贝尔团队·鱼
