紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：midanshen1紫外分光光度法测定蛋白质含量一、实验目的1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理；2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。二、实验原理1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应：定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。三、仪器与试剂TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、实验步骤1.绘制吸收曲线用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl。
紫外分光光度法，做实验时绘制标准曲线，为什么要扣除空白。 【】扣空白，是符合浪白比尔定律的需要；【】绘制曲线是用扣空白的吸光度对应其浓度，制备标准曲线。
如何做好紫外分光光度法的工作曲线 要做好工作曲线，也就意味着使工作曲线的相关系数接近1.那么要求在实验过程中我们需要在实验的准备、配制标准系列和测量中做好各种细节，以达到最大程度减少误差，从而得到相关系数接近1的工作曲线.
什么是紫外可见分光光度法的吸收曲线 在同一温度下，用不同波长的单色光，测定同一样本的吸光度，然后建立一个X轴表示单色光波长（或频率)频率，Y轴表示吸光度，将测定所得数据在此坐标上描绘出波长与吸光度地关系的曲线，这就是该样本的吸收曲线。也就是说，反映样本吸光度与通过样本的光波波长关系的一条曲线。每种物质的吸光度曲线是相同的，这是分光光度计的测量基本原理。
等吸收双波长法实验？ 双波长吸收法是很常用的实验.A2-A1和浓度C有线形关系啊，故应作曲线图，根据实验得出吸收度差值A'，从而就求得浓度C.吸收度差值A'=A2-A1=ECL(表达式书写不便.)设样品在波长1和2处的吸收度为A1和A2，测定组分在波长1和2.
紫外分光光度法，做实验时绘制标准曲线，为什么要扣除空白。比如说空白值是0.003，之后的每个数都需要减去0.003，如果这样的话为什么第一个数不是从零开始，绘制曲线是用△。
