三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的原理是什么? 因为含维生素A原料中常常2113混有许多杂质,包括异构5261体,氧化降解产物,合4102成中间体,副产物等有关1653物质,且含有稀释用油,这些杂质在紫外区也有吸收,导致在维生素A最大吸收波长处测得的吸光度并不是维生素A独有的吸收,为了消除其他物质引起的误差,所以采用三点校正法。三点波长的选择原则:一点选在维生素A的最大吸收波长处,其他的两点各在这一波长两侧选一点。这两点有两种选择方法,第一种是等波长差法,即最大吸收波长为328nm,左侧一点为316nm,右侧一点为340nm.这是10版药典规定测定维生素A醋酸酯的方法。第二种方法是等吸收比法,即左右两波长处的吸光度相等等于最大吸收波长处吸光度的七分之六。10版药典规定测定维生素A醇时用此方法。
用紫外分光光度法测定维生素A含量时,为什么采用三点校正法 因为含维生2113素a原料中常常混有许多5261杂质,包括异构体,氧化降解产物,合成中间体4102,副产物等1653有关物质,且含有稀释用油,这些杂质在紫外区也有吸收,导致在维生素a最大吸收波长处测得的吸光度并不是维生素a独有的吸收,为了消除其他物质引起的误差,所以采用三点校正法。三点波长的选择原则:一点选在维生素a的最大吸收波长处,其他的两点各在这一波长两侧选一点。这两点有两种选择方法,第一种是等波长差法,即最大吸收波长为328nm,左侧一点为316nm,右侧一点为340nm.这是10版药典规定测定维生素a醋酸酯的方法。第二种方法是等吸收比法,即左右两波长处的吸光度相等等于最大吸收波长处吸光度的七分之六。10版药典规定测定维生素a醇时用此方法。
紫外分光光度法测定维生素AD胶丸中维生素A的含量。求助,测出的吸收度比值计算吸光度的公式。 吸光度的计算公式的原理是朗伯-比尔定律 A=lgI0/I=-lgT 其中A为吸光率 T为透光率 I0为入射光强 I为透过光强 虽然我很聪明,但这么说真的难到我了
紫外-可见分光光度法测定
用紫外分光光度法测定维生素A含量时,为什么采用三点校正法 核酸、核2113苷酸及其衍物结构嘌呤、嘧啶碱基具5261共轭双健系统(-C=4102CC=C),能够强烈1653吸收250~280nm 波紫外光.核酸(DNA,RNA)紫外吸收值260nm 处.遵照Lambert-Beer 定律,紫外光吸收值变化测定核酸物质含量.同pH 溶液嘌呤、嘧啶碱基互变异构情况同,紫外吸收光随表现明显差异,摩尔消光系数随同.所,测定核酸物质均应固定pH溶液进行.核酸摩尔消光系数(或吸收系数),通ε(ρ)表示,即每升含摩尔核酸磷溶液260nm 波处消光值(即光密度,或称光吸收).核酸摩尔消光系数数,依赖于材料前处理、溶液pH 离强度发变化.经典数值(pH=7.0):DNA ε(ρ)=6 000 8 000RNA ε(ρ)=7 000 10 000牛胸腺DNA 钠盐溶液(pH=7.0)ε(ρ)=6 600,DNA 含磷量9.2%,含1μg/mL DNA 钠盐溶液光密度0.020.RNA 溶液(pH=7.0)ε(ρ)=7 700~7 800,RNA 含磷量9.5%,含1μg/mL RNA 溶液光密度0.022~0.024.采用紫外光光度测定核酸含量,通规定:260nm 波,浓度1μg/mL DNA 溶液其光密度0.020,浓度1μg/mL RNA 溶液其光密度0.024.,测定未知浓度DNA(RNA)溶液光密度OD260nm,即计算测其核酸含量.该简单、快速、灵敏度高,核酸3μg/mL 含量即测.于含微量蛋白质核苷酸等吸收紫外光物质。