紫外分光光度法测定蛋白质
紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：midanshen1紫外分光光度法测定蛋白质含量一、实验目的1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理；2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。二、实验原理1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应：定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。三、仪器与试剂TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、实验步骤1.绘制吸收曲线用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl。
求怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量？ 1紫外吸收光谱是基于物质的生色团和助色团的特性对紫外光谱的吸收，可用于物质的鉴定和结构分析.2参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统，在紫外光区（220-300nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（lmax）分别为279、278、和259nm。由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基，因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。因此可以用标准曲线法在280nm测样品吸光度，求得蛋白含量。
我们测蛋白质溶解度用的是紫外分光光度法，可以不用标准蛋白么 是测溶液蛋白质浓度吧。必须要有标准曲线。你得知道你的蛋白的epsilon值，就是extinction coefficient。如果你有该蛋白的标准曲线，你就可以直接根据紫外读数，对照标准曲线对应出蛋白浓度，如果没有的话，只能读出样品的紫外吸光值，对照其他已知extinction coefficient的蛋白的标准曲线，然后查你的蛋白的extinction coefficient，然后除以这个coefficient得出浓度。我们现在通常用Nano Drop测蛋白浓度，程序里有一个自带的extinction coefficient为1的蛋白的标准曲线，所以只要把测得的浓度除以你的蛋白实际的extinction coefficient就可以了，很方便。
紫外分光光度计测定蛋白质含量，紫外分光光度计在调校好对应的波长后，可以测定待测定定的蛋白质的浓度等等。
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点受哪些因素的影响和限制
求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量 谢谢了哈 只要紫外分光光度法测定，不要其他测定方法哈 四种紫外吸收法：1.280nm的光吸收法 用标准曲线法进行测定。。
