食品中大肠杆菌的检测 GB 4789.3—52612010《食品安全国家标准 食品微生物4102学检验 大肠菌群计1653数》第一法：大肠菌群MPN 计数法。第二法：大肠菌群平板计数法。两种方法适用于各类食品中大肠菌群的计数。大肠菌群（Coliforms）是一群在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，其主要检测意义在于反映食品卫生状况并推测其存在肠道致病菌的可能性。常以大肠菌群作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。第一法：进入无菌操作室前应更换无菌实验服，戴帽子、口罩、无菌手套。进入无菌操作室后，将镊子在酒精灯外焰充分灼烧，夹取适量酒精棉全面擦拭双手，然后才能进行实验操作。酒精易燃，因此在擦拭双手的过程中应离开酒精灯火焰一定距离，防止出现危险，待手上的酒精挥发后，再进行实验操作。样品的稀释：取一洁净无菌均质袋于自动稀释仪上，将称样勺于酒精灯外焰灼烧片刻，准确称取25g样品于无菌均质袋中。用酒精灯外焰灼烧注水口片刻，在盛有样品的均质袋中注入225mL无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液。取下均质袋，将均质袋放入拍击式均质器中，用均质器拍打1min～2min，制成1：10的样品匀液。注意：样品匀液的。
如何破坏黄原胶粘性？ 黄原胶是一种类白色或浅米黄色粉末，是目前国际上集增稠、悬浮、乳化、稳定于一体，性能最优越的生物胶。黄原胶无味、无毒、食用安全、易溶于水，在水溶液中呈多聚阴离子，。
怎样分离大肠杆菌和芽孢杆菌，需要详细的步骤，谢谢！ 分离大肠杆菌：1、划线分离法将培养皿底部，用拇指和无名指固定成倾斜状态，在火焰旁，将培养皿稍微打开。在此同时，用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液，迅速送入培养皿内，在平板培养基的一边，作第一次平行滑线3到5条。转动培养皿约70度角用烧过冷却的接种针，通过第一次滑线部分作第二次平板划线，然后再用同样方法，通过第二次平行滑线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。划线时接种针应与平板表面成30度角左右，不要使接种针碰到培养皿边缘，也不要将培养划破，划线完完毕后，盖上皿盖，倒置于恒温箱培养。2、涂布分离法先将培养的菌液稀释通常稀释到10^-5到10^-7之间，然后取0.1ml不同稀释度的稀释菌液，放在培养皿的固体培养基上。用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落，通常每个培养皿有20个以内的单个菌落最为合适。将每个菌落分别接在斜面上扩增培养后，再做功能性实验。向左转|向右转分离芽孢杆菌：先进行富集培养，挑取具有芽孢的菌落进行划线纯化培养，获得单菌落。取富集菌液，至于75度到80度水浴15到20分钟，梯度稀释10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7，选择三个合适的。
能给我说一下固体培养基倒平板详细过程么？详细到加多少量 首先将你配置好的培养基进行灭菌，然后在超净工作台中操作，在培养基凝固前倒入培养皿中，一般规格的培养皿将底遮盖住需15ml左右的培养基.要看你的平板做什么用，如果是划菌落用只需15ml左右就够了，如果做其他的可以增加它的量.
涂布好的平板培养时为何要倒置？ 1.倒置比正放更加不容易污染杂菌；空气间也有杂菌，另外皿和盖虽然消毒杀菌，但是在操作过程中，接触的外表仍然可能污染，倒置可以使杂菌尽可能少接触培养基。2.倒置培养可以防止培养基内的水分蒸发，使培养基保持湿润。如果涂完平板后有液体的话可以先正放，等液体吸收后再倒置。一般按照固定量来涂板的话不会有这种情况。3.倒置可以防止水分冷凝后滴到培养基上，导致菌落蔓延，无法计数。
什么是摇瓶培养法 摇瓶培2113养是在菌种的筛选培养阶5261段（中试），培养条件要尽可能和发酵4102生产的培养条件相近，但工作量大、时间1653长、操作复杂；而自动发酵罐培养是摇瓶培养的工业化生产。以食用菌金顶侧耳为试验研究对象；用综合PDA(马铃薯20 g，葡萄糖20 g，硫酸镁1.5 g，磷酸二氢钾3.0 g，水1 000 mL，pH自然)为液体培养基；以(25±1)℃，180 r/min为气浴恒温振荡器的温度和振荡速率。设定了60、80、100、120、140 mL5个不同的装液量。经过7 d的摇瓶培养，过滤发酵液，得到菌丝体和粗酶液。再通过测定菌丝体烘干后的生物量，以及测定粗酶液中多酚氧化酶和漆酶活性，得出了：装液量为100 mL，菌丝体烘干生物量明显大于其他装液量；装液量为140 mL，有利于多酚氧化酶的分泌，酶的活力较强，并且其活力随装液量的递增而变强。装液量为100 mL，有利于漆酶的分泌，酶的活力较强，不同装液量的菌丝生长都在第6天出现了高峰期，其中以装液量为100 mL/250 mL时，其菌丝球数量较多。扩展资料：鸡腿菇菌种摇瓶培养条件对鸡腿菌cc168品种摇瓶培养的培养条件和对固体方法与和液体的方法制作的原种在栽培袋中的生长天数和长速进行计载和测定，结果表明，其适宜的条件为摇瓶培养振荡频率为70次/min；光照强度。
细菌培养每个培养皿倒多少毫升培养基 15ml左右。细菌5261培养，平皿中培养基要求完全覆盖皿底，厚4102度2-3mm，直径90mm的平皿，半径4.5cm，厚度2-3mm，需要的培养基体积V=3.15*4.5*4.5*0.2（或16530.3）=12.7ml（或19.1ml），因此需要15ml左右，具体厚度需要根据实验要求酌情增加培养基的倒入量。倒平板的时候不宜过厚，过厚移菌不好移，容易粘在打孔器上，而其移到下一个培养基上培养条件不同，原培养基太多的话，不利菌适应新的环境，过薄则不利于微生物生长。扩展资料：培养基配制原则1、选择适宜的营养物质总体而言，所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源，但由于微生物营养类型复杂，不同微生物对营养物质的需求是不一样的，因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。2、营养物质浓度及配比合适培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用，例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑菌或杀菌作用。3、控制pH条件培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢。
容易产孢子的曲霉，怎么样接种，不会污染自己平板和别人的平板？ kissyls(站内联系TA)最好不要交叉做各种菌，很容易交叉感染的冼亮淀粉酶(站内联系TA)筛菌的工作量可以是很大的，假如每个菌都做孢子液就徒增两倍多工作量，延缓实验进度。霉菌的孢子成熟需要时间，在刚长孢子还没成熟的时候不容易脱落，这时候用牙签连同菌丝一起挑起来。紫外灭菌后，超净台的风机不要开高档，不然容易把一些散孢子吹掉。下面的照片是孢子量极其丰富的黑曲霉，一张是刚开始产孢子的，孢子不容易脱落；另一张是孢子完全成熟的，容易脱落。筛菌的工作量可以是很大的，假如每个菌都做孢子液就徒增两倍多工作量，延缓实验进度。霉菌的孢子成熟需要时间，在刚长孢子还没成熟的时候不容易脱落，这时候用牙签连同菌丝一起挑起来。紫外灭菌后，超净台的风.但是筛菌的时候要等菌丝和孢子都长成才可以准确的描述生物学性状的，所以有时候不得不等孢子成熟。只是说等菌筛出转接的时候可以稍微提早些。我建议做真菌的还是尽量使用单独的桌面上的那种小的超净工作台吧。然后可以定期进行除菌处理。冼亮淀粉酶(站内联系TA)清洁措施肯定也是越严密越好，别说超净台了，接种室都可以单独一间，而且墙面装好紫外灯。我们是单独一间，但是还没装紫外灯。生物学性状是指菌落形态？。
LB培养基如何配制？ 以配制2113一升培养基为例：应该在950 ml去离5261子水中加入：胰蛋白胨410210g酵母提取物5gNaCl 10g摇动容器直至溶质溶解。用16535mol/LNaOH调pH至7.0，用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌21min。扩展资料：配置原则：1、选择适宜的营养物质就微生物主要类型而言，有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分，培养它们所需的培养基各不相同。在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌，用高氏I号合成培养基培养放线菌，培养酵母菌一般用麦芽汁培养基，培养霉菌则一般用查氏合成培养基。2、营养物质浓度及配比合适培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累，其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲，碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。3、控制pH条件培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生。
