几种细胞固定方法 选择最佳固定液标准是:(1)最好地保持细胞和组织的形态结构;(2)最大限度地保存抗原的免疫活性。一些含重金属的固定液在免疫组化和细胞化学技术中是禁用的;(3)不要用可能带有自发荧光的固定剂,如带有苦味酸的固定剂,还有甲醛升汞固定液,会使上皮细胞产生非特异性荧光;(4)固定剂的选择、固定时间、温度和PH值都会影响实验结果。单纯e799bee5baa6e997aee7ad94e58685e5aeb931333332633061固定液(1)4%中性甲醛固定液:最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作(Job)。中性甲醛是以PH7.2-7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不超过一个月。甲醛(40%)100ml 无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4.0g 蒸馏水 900ml(2)乙醇固定液:使用时以80%-95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,假如用于证实尿酸结晶和保存糖原,可用于100%乙醇固定组织。(3)4%多聚甲醛固定液:主要用于培养细胞的固定。混合固定液(1)乙醇-甲醛(乙醇-。
萋尼抗酸染色法的判定标准是什么?
冰冻切片染he染色,需要变成石蜡切片吗? 1.冰冻切片较厚,一般20-30?0?8m,步骤相对简单一点。石蜡切片较薄,5?0?8m左右,步骤麻烦一些,但蜡块做好后,可保存很长时间,一劳永逸。一般来说,HE染色或免疫组化,能做石蜡切片的尽量做石蜡切片,结果会漂亮一点。2.冰冻切片前,组织块要泡糖。脑组织在30%蔗糖溶液浸泡2-3天,沉底后切片,否则,组织中的水分低温下会形成很多冰晶。3.一般来说,有条件的话最好灌流后取材,这样既能充分固定,更重要的是组织中不会残留红细胞。建议先用正常大鼠心脏做一下预实验,摸索一下条件。
结晶紫染液、番红染液如何配制? 1、结晶紫 染液:结晶紫 乙醇 饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵 水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。2、番红溶液:番红O(safranine,又称沙黄O)2.5g,。
几种细胞固定方法
影响革兰染色的因素有哪些? 染色时间,细菌固定时受热要均匀,染色时注意温度,玻片与火焰高度为手放在火焰上不是很烫高度为宜,同时不断加染液.这个实验做过时间长了有些细节不记得了》》》
世界上有哪些奇特或者罕见的病症?
关于神经尼氏小体的知识? 尼氏小体(Nissl’s Body)甲苯胺兰染色的牛脊髓涂片,尼氏小体即光镜下的粗面内质网。在低倍镜卡观察,染成蓝色的大三角形、星形细胞就是脊髓前角神经细胞,染色较深的小细胞为神经胶质细胞。转换高倍镜观察,可见脊髓前角神经细胞的细胞质中许多蓝色颗粒或网状结构即为尼氏小体,尼氏小体指存在于各种脊椎动物和无脊椎动物的神经细胞中的嗜碱性的颗粒群,发现者是G.Retzius和A.key(1876),而Fr.Nissl于十九世纪八十年代对尼氏小体首先确立了初期的固定染色方法,命名者则是von Lenhossek(1896)。尼氏小体呈粒状、微粒状或虎斑状(tigroid),分散在神经胞质的内部(由于在脊髓前角的运动神经细胞内的尼氏小体是典型的虎斑状,所以又称为虎斑样物质)。在轴突和轴丘(axotnhillock)内不含尼氏小体,很早就推断这种物质是核蛋白,但在查明它能被核糖核酸酶分解、能吸收紫外线、并具有富尔根阴性反应以后,进而用电子显微镜检查,确认它是糙面内质网的核糖体。根据尼氏小体的光学显微镜照片,认为这是在标本制作过程中起了变化的产物。尼氏小体从来就受到重视,因为它是作为表示神经细胞功能活性的形态指标。由于轴突的切断、过分的刺激、高龄,这种颗粒会破碎并逐渐消失。
问答题,抗酸染色的操作步骤与结果判断。 抗酸染色2113的原理:分枝杆菌的细胞壁内5261含有大量的脂质,主要4102是分枝菌酸,它包围在肽聚1653糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。抗酸染色一般步骤(不同厂家出产的试剂盒会有不同,可见说明书)1)初染用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。2)脱色3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。3)复染用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。经过抗酸染色,分枝杆菌为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。