细菌的纯种分离和接种技术注意事项有哪些 细菌的纯种分离和接种技术中,需要注意的事项有:1)稀释度的问题纯种分离的时候,无非是把菌液稀释一定梯度后,涂布在诸如LB培养基上。如果没有稀释好,就会导致细菌长得太密,或者是细菌根本不长。最优的稀释梯度是最后在平板上的菌落数在30至300之间。此时,能清楚地看清菌落的形态,便于挑取单菌落;2)杂菌污染的问题因为用于接种的一般都是营养丰富的有机培养基,这种培养基适合任何细菌生长。在操作过程中,空气和桌面上都会有大量看不见的细菌潜在。在分离和接种前,所有用到的器具和培养基必须在121摄氏度下灭菌20分钟至30分钟。在倒平板时,最好在培养基还是热的时候倒,以减少杂菌感染。所有的操作最好在超净工作台上完成。若没有超净工作台,那就拿两个酒精灯点燃,并用酒精擦拭桌面,在两个酒精灯之间操作。综上,想要较好地分离和接种细菌,操作人员必须完全保证杂菌的感染,操作熟练,在温度和洁净度上做到最严格。培养基灭菌后,需要冷却到50,才能倒平板,原因是什么 如果仅仅是倾倒琼脂,以配置培养基琼脂平皿,那么如果温度过高即倾倒会使凝固后的琼脂偏软而使得划线接种变得困难,同时也会使水汽增多容易引起污染。如果是进行菌落计数而进行倾倒琼脂,那么冷却到一定程度还能防止细菌被烫死。接种细菌的三种方法各有什么用途 接种细菌的方法各有什么用途:1、平面接种法:此方法主要用于鉴定或保存菌种,或观察细菌的某些生化特性和动力。2、菌落分纯法:此方法主要用于分离琼脂平板上的混合菌。3、液体培养基接种法:此方法可用于比浊试验中。4、平板划线接种法(又称分离培养法):平板划线接种法为最常用的分离培养细菌的方法,通过平板划线后,可使细菌分散生长,形成单个菌落,有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌。平板分离划线的方法比较多,其中以分区划线发育曲线划线法较为重用。其目的都要时细菌呈现单个菌落生长,便于同杂菌菌落鉴别。5、纯培养细菌接种法:用于培养保存菌种及其实验用。6、半固体培养基穿刺培养法:用于保存菌种及间接观察细菌之动力(无动力之细菌仅沿穿刺线生长,清晰可见;有动力的细菌使培养基呈现浑浊样,穿刺线甚至难以看出。接种注意事项:1、在超净工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等。2、应在酒精灯火焰前操作。3、取菌种前灼烧接种针或接种环(要烧红)。4、烧红的接种针(环)少使冷却在取菌种,以免烧死菌种。5、接种后应尽快塞上面塞。培养皿倒完平板,冷却后接种菌液后,放到培养箱,忘记倒置,会不会影响实验结果? 菌株长得会比较差.而目标菌长的不好意味着可能会增加污染的可能平板培养基接种后为什么要倒置培养 培养的2113时候倒置的原因有:1)防止培5261养基4102的水分蒸发,特别是培养基倒的1653时候如果倒的比较少的时候更容易干掉,影响微生物生长.2)防止形成的冷凝水滴落在培养基上造成染菌.3)倒放可以在某种程度上防止菌落蔓延,好形成单个菌落,利于计数细菌平板分区划线时,为何在每区之间要将接种环上的剩余细菌烧掉 这是一种稀释方法:有点到线,每次把接种环上的菌烧掉使得新划出的线的菌就是来自于上一次划线的一个点,这样可以达到逐渐稀释的目的,划到最后的就会长成单菌落,以便后面的实验。平板接种的方法,平板接种即用接种环将菌种接至平板培养基上,或用移液管、滴管将一定体积的菌液移至平板培养基上,然后培养。平板接种的目的是观察菌落形态,分离纯化菌种,。培养皿接种后为什么要倒置培养 1、倒2113置培养可以防止污染:为了防止正置培养时培养皿5261盖上出现的4102蒸馏水流到培养皿上,1653导致菌落成片,不能计数或分离等。同时也减少染菌的可能。2、方便观察计数:平板倒置进行微生物培养时,培养基表面生长的菌落相对不会太快扩散,观察时有利于辨别菌落特征。3、利于菌落出现:倒置后,琼脂表面不会残留水份,否则有水的话,细菌在表面生长成菌膜,菌落难以出现。扩展资料细胞培养的环境要求1、无菌环境:无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内,解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。2、合适的温度:一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37~38℃,不适宜的环境温度会影响细胞的生长。3、适宜的渗透压:高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此,渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。参考资料来源:-细胞培养参考资料来源:-接种参考资料来源:-稀释倒平板法细菌培养时为什么要把培养皿反转 除去冷凝水。有时凝固后的培养基表面有冷凝水,可将平皿盖打开倒置于37℃温箱,除去冷凝水,否则将影响平板分离培养效果。为防止冷凝水过多,也可将培养基冷却至45~50°C再倒平板。由于细菌无处不在,因此从制备培养基时开始,整个培养过程必须按无菌操作要求进行,否则外界细菌污染标本,会导致错误结果;而培养的致病菌一旦污染环境,就会引起交叉感染。扩展资料培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基,制定培养条件(温度、pH值、时间,对氧的需求与否等)。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上,做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。一般细菌可在有氧条件下,37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。参考资料来源:-细菌培养参考资料来源:-平板培养基
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