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什么是核内不均一RNA 胞质胞核rna分离

2020-10-15知识10

在观察DNA和RNA在细胞中的分布,盐酸起什么作用 盐酸的作用有两点:一是改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;二是使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。

什么是核内不均一RNA 胞质胞核rna分离

细胞骨架的类型和功能是什么 细胞骨架是真核细胞中由蛋白质聚合而成的三维的纤维状网架体系。细胞骨架类型:微丝、微管和中间纤维。微丝:确定细胞表面特征,使细胞能够运动和收缩。微管:确定膜性细胞器的位置和作为膜泡运输的导轨。中间纤维:使细胞具有张力和抗剪切力。功能:维持细胞的形态,为各种细胞器的定位和实施功能提供基础,确保细胞中各种生命活动在时间和空间上有序进行。微丝、微管和中间纤维位于细胞质中,又称胞质骨架,它们均由单体蛋白以较弱的非共价键结合在一起,构成纤维型多聚体,很容易进行组装和去组装,这正是实现其功能所必需的特点。

什么是核内不均一RNA 胞质胞核rna分离

细胞质蛋白和细胞核蛋白怎么分离核蛋白是指在细胞质内合成,然后运输到核内起作用的一类蛋白质。如各种组蛋白、DNA合成酶类、RNA转录和加工的酶类、各种起调控作用的蛋白因子等。核蛋白一般都含有特殊的氨基酸信号序列,起蛋白质定向、定位作用。1.核定位序列(核定位信号,NLS):亲核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列,这些内含的短肽保证了整个蛋白质能够通过核孔复合体转运到细胞核内,这段具有“定向”、“定位”作用的序列被称为核定位序列。2.核输出信号(NES):作为核内物质输出细胞核的信号,帮助核内某些分子迅速通过核孔进入细胞质,位于核内合成然后被运输到细胞质工作的分子中。

什么是核内不均一RNA 胞质胞核rna分离

如何分离DNA和RNA? [思路分析]①取鸡血细胞液(其红细胞椭圆具核,除骆驼外,猪、羊、狗等哺乳动物红细胞无核),或取新鲜猪肝、菜花、洋葱等材料.虽然在细菌的转化实验中提取的是无核细胞中的DNA,但一般而言,均是从具核的生物材料中提取DNA.当然,在提取出的DNA中也含有一定量的胞质DNA,即线粒体DNA和叶绿体DNA.值得推介的材料是洋葱,取材容易,操作简便,效果明显.将家用加盐洗洁精与洋葱碎屑混合研磨并过滤后,再加酒精,微摇后即出现白色的毛絮状DNA混合物.②使红细胞溶血破膜以及化学药剂十二烷基磺酸钠 SDS(洗洁精的主要成分)或三氯乙酸溶膜.在低渗溶液中,如加蒸馏水使血细胞过度渗透吸水直至破裂,同时用玻棒加速血细胞及核破裂,经一级过滤后滤出液为DNA核蛋白和RNA核蛋白.对于菜花、洋葱等植物材料,在研磨破坏其细胞壁的同时,可考虑适量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解.③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA.在浓氯化钠溶液(2 mol/L)中,DNA核蛋白的溶解度很大,而RNA核蛋白的溶解度很小.在稀氯化钠溶液(0.14mol/L)中DNA的溶解度最低,蛋白质的溶解度很高而出现盐溶现象,经二级过滤后滤出液主要为DNA粗制品.④DNA不溶于酒精,经三级过滤后,再利用乙醇沉淀法使其他物质溶于酒精而进一步纯化。

观察DNA和RNA在细胞中的分布

分离DNA和RNA主要方法有哪些 [思路分析]:①取鸡血细2113胞液(其红细胞椭圆具核5261,除骆驼外,猪、羊、4102狗等哺乳动物红细胞无核),或取新鲜猪肝1653、菜花、洋葱等材料.虽然在细菌的转化实验中提取的是无核细胞中的DNA,但一般而言,均是从具核的生物材料中提取DNA.当然,在提取出的DNA中也含有一定量的胞质DNA,即线粒体DNA和叶绿体DNA.值得推介的材料是洋葱,取材容易,操作简便,效果明显.将家用加盐洗洁精与洋葱碎屑混合研磨并过滤后,再加酒精,微摇后即出现白色的毛絮状DNA混合物.②使红细胞溶血破膜以及化学药剂十二烷基磺酸钠 SDS(洗洁精的主要成分)或三氯乙酸溶膜.在低渗溶液中,如加蒸馏水使血细胞过度渗透吸水直至破裂,同时用玻棒加速血细胞及核破裂,经一级过滤后滤出液为DNA核蛋白和RNA核蛋白.对于菜花、洋葱等植物材料,在研磨破坏其细胞壁的同时,可考虑适量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解.③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA.在浓氯化钠溶液(2 mol/L)中,DNA核蛋白的溶解度很大,而RNA核蛋白的溶解度很小.在稀氯化钠溶液(0.14mol/L)中DNA的溶解度最低,蛋白质的溶解度很高而出现盐溶现象,经二级过滤后滤出液主要为DNA粗制品.④DNA不溶于酒精,经三级过滤后,再利用乙醇沉淀法使其他。

如何分别从细胞浆和细胞核中抽提RNA操作步骤:样品处理:a.植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。b.动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。c.贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。d.细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。e.血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。

什么是核内不均一RNA 在真核细2113胞核内可以分离到5261一类含量很高,分子量很大但不稳定的RNA,称为4102核内不均一RNA(heterogenous nuclear RNA,hnRNA),其平均分子长度为8-10Kb,长度变化的范围从2Kb左右到14Kb左右。比mRNA的平均长度(1.8-2Kb)要大4-5倍。估计hnRNA仅有总量的1/2转移到细胞质内,其余的都在核内被降解掉。人们经分析认为它是mRNA的前体,证据是:(1)hnRNA和mRNA有相同的序列。用小鼠核内hnRNA分离出的1.5Kb(15S)的RNA分子和10Sβ-珠蛋白mRNA分别与小鼠的b-珠蛋白基因都可进行分子杂交,形成R环。实验结果表明hnRNA中存在与mRNA相同的序列,但比mRNA更为复杂。此是hnRNA是mRNA前体的最有力的证据。(2)hnRNA在体外能作为模板翻译蛋白,这也是hnRNA的mRNA前体的直接证据;(3)两者5′端都有帽子结构,其它的RNA分子和前体都没有这种特殊的结构。(4)两者的合成同样不为低剂量放线菌素D所抑制,但能被高剂量所抑制,表明两者为相同的聚合酶所合成。(5)两者的3′端都有多聚腺苷有尾巴,这也是其它的RNA分子所没有的。根据以上证据表明:hnRNA和mRNA之间关系密切,不说全部的hnRNA,至少是部分hnRNA是mRNA的前体。但由于它已有5′帽结构和3′poly(A)尾巴,所以它。

RNA那里说的大小亚基是什么?有什么区别? 真核细胞 的大小亚基是在核中形成的,在核仁部位rDNA转录出45S rRNA,是rRNA的前体分子,与胞质运来的蛋白质结合,再进行加工,经酶裂解成28S,18S和5.8S的rRNA,而5S rRNA则在。

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