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细菌基因组的提取原理 离子交换胰酶的分离提取

2020-07-21知识5

生物药物和生物制药有什么区别? 生物药物 基本概念 生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果,从生物体、生物组织、细胞、体液等,综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的。协同用药的三个步骤 国内在生化药物的研究方面存在较多的问题,主要表现在以下几个方面:1、对原材料没有进行严格的控制;2、无病毒灭活的工艺步骤;3、质量研究内容不够全面等。致使审评人员难以把握其质量,且产生了的安全性担忧。一、生化药物的制备方法生化制药就是将动物、植物或微生物机体内的生物活性物质在其结构和功能不遭破坏的前提下,采用多种生化分离的方法提取、纯化的工艺过程。生化制药的六个阶段:1、原料的选择和预处理;2、组织及细胞的破碎;3、从破碎的细胞中提取有效成分制成粗品;4、采用多种生化技术从粗品中将目的物精制出来;5、干燥及保存;6、制剂。以上各阶段在不同的生化药物制备中,根据所选材料的不同,可灵活取舍选择使用。生化药物的分离纯化方法主要有五类:1、根据分子大小和形状不同进行分离,如凝胶过滤法、透析和超滤法、密度梯度离心法等;2、根据分子的带电性质进行分离,如离子交换层析法、电泳法、等电聚焦法;3、根据分子极性大小及溶解度不同进行分离,如等电点沉淀法、盐析法、有机溶剂沉淀法、逆流分配法等;4、根据配体特异性进行分离,如亲和层析法;5、根据物质吸附性质不同进行分离,如选择性吸附和吸附层析法。二、生化药物质量控制研究要点。胶原蛋白的提取分离 由于胶原是细胞外间质成分,在体内以不溶性大分子结构存在,并与蛋白多糖、糖蛋白等结合在一起,因此胶原的制备包括材料的选择、预处理、酸碱酶盐水法提取、不同类型胶原的分离和纯化。除胶原蛋白外,动物骨中还含有油脂、多种矿物质和其他杂质,因此在被用于提取胶原蛋白之前必须进行预处理。先剔除动物骨上残留的肉质和肌腱等杂物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油。最后除去骨中无机物以提高胶原蛋白的得率。除去骨中的矿物质可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍质量的1.0moL/LHCL脱钙处理2d,用正乙烷脱脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值1.7,37℃条件下处理120min,然后在固液比1∶6的情况下抽提5h,在此条件下,提取率可达18%;还有人用EDTA溶液(pH7.4)浸泡骨料5d,可有效脱去骨料中的羟基磷灰石。胶原蛋白的提取一般有三种方法:一是高压辅助的物理方法;二是用溶剂预处理结合低温或热水抽提的化学方法,根据溶剂的不同,可分为热水浸提法、酸法、碱法、盐法;三是用酶的生物化学法。一般来说,高压辅助和热水抽提针对明胶的提取,而低温抽提和酶法针对胶原的提取,但其基本原理都是根据胶原蛋白的特性改变蛋白质所在的外界环境,把胶原蛋白从。胆汁回流 你好 胆汁反流性胃炎的中医辨证,大多属于脾胃升降失调、水饮停滞胃脘,兼有肝气郁结。按此辨证结果对症下药,效果比较理想。硫酸皮肤素的制备工艺 可用中性盐法、酸法、碱法、酶解法等提取DS。目前多采用碱提取与酶解提取相结合的方法。高华等在碱-酶解的提取方法中加大了碱的浓度,用lmol/L 氢氧化钠溶液提取2h,时间缩短并可避免杂质析出,DS的收率和纯度分别达到了32.6%和95.2%。胥传来等则在鳖鱼软骨的酶解提取DS前先用2%乙酸钠盐解,产品含氮量可下降0.67%,而氨基己糖质量分数提高了1.87%,具有一定工业生产价值。李瑞国对浓碱-酶解(I)、稀碱-酶解(II)、稀碱稀盐-酶解(III)和稀碱浓盐(IV)4 种提取工艺进行了比较,发现工艺I 提取时间短、产品颜色深而分子量较小;工艺II、III、IV操作较容易、产品色泽好且分子量较大,尤以工艺IV制得的产品质量较好。华子义采取碱性复合酶和胰酶双酶解法提取CS,得率比传统方法提高了1%-2%,生产周期缩短1/3,生产成本降低5%。Nakano等以0.1mol/L乙酸钠在pH 4.5、3 7℃条件下先预处理牛鼻软骨,使软骨组织在内源酶作用下自动分解,从而无需使用外源酶,生产成本降低,经DEAE离子交换色谱纯化可得含DS 89%的GAGs混合物。可利用各种GAGs不同的溶解度、电荷密度进行分级分离纯化CS。常用分离方法有乙醇沉淀法、盐液沉淀法、季钱盐络合法和离子交换色谱法,其中乙醇沉淀法最常用。高华等采用先。

#大豆分离蛋白#胰蛋白酶

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