鸡胚孵化和鸡胚病毒接种有哪些关键因素和步骤 [实验材料]白壳鸡胚、孵化箱、1mL注射器、蛋架、新城疫工系和Ⅱ系弱毒苗等。[实验准备]1.鸡胚的选择和孵化应选健康无病鸡群或SPF鸡群的新鲜受精蛋。为便于照蛋观察,以来航鸡蛋或其他白壳蛋为好。用孵卵箱孵化,要特别注意温度、湿度和翻蛋。孵化条件一般选择相对湿度为60%,最低温度36℃,一般37.5℃。每日翻蛋最少3次,开始可以将鸡胚横放,在接种前2d立放,大头向上,注意鸡胚位置,如胚胎偏在一边易死亡。孵化3~4d,可用照蛋器在暗室观察。鸡胚发育正常时,可见清晰的血管及活的鸡胚,血管及其主要分枝均明显,呈鲜红色,鸡胚可以活动。未受精和死胚胚体固定在一端不动,看不到血管或血管消散,应剔除。鸡胚的日龄根据接种途径和接种材料而定,卵黄囊接种,用6~8日龄的鸡胚;绒毛尿囊腔接种,用9~10日龄鸡胚;绒毛尿囊膜接种,用9~13日龄的鸡胚;血管注射,用12~13日龄鸡胚;羊膜腔和脑内注射,用10日龄鸡胚。2.接种前的准备病毒接种材料的处理怀疑污染细菌的液体材料,加抗生素(antibiotic)(青霉素100~500IU和链霉素100~500μg)置室温中1h或冰箱12~24h高速离心取上清液,或经滤器滤过除菌。如为患病动物组织,应剪碎、研磨、离心取上清液,必要时。
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