紫外_可见分光光度法，用吸收系数法定量，公式是什么？ 紫外分光光度法含量 公式

最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：记忆_染成画紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry，UV-VIS)1定义：它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析，所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。2分类：按所吸收光的波长区域不同：分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。3、紫外-可见分光光度法的特点：（1)其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快；（与其它光谱分析方法相比）（2）灵敏度高；（3）选择性好；（4）精密度和准确度较高；（5）用途广泛。1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。2.有机化合物的紫外-可见吸收光谱2.1有机化合物的电子跃迁与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种，即。紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量？ 根据朗伯比尔定律得出：当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时，由于溶质吸收了光能，光的强度就会减弱。溶液浓度越大，液层越厚，入射光越强，光被吸e5a48de588b6e799bee5baa631333431336161收的就越多。如果用公式表示的话，就可以表示为表示为：A=E*C*L（A为吸光度，C为溶液浓度，L为液层厚度）。E是物质在一定波长下的特征常数，与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质（如：固、液、气）。在进行含量测定的时候，我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长，以防止外界干扰。于是，我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量，过程如下：A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)由于标准液和待测液中的物质相同，故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等，物质含量m=C*V*M（M为相对分子质量，V为体积）故m2=（A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。扩展资料：在分光光度分析中，比尔定律是一个有限的定律，其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等，无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射；入射光为单色平行光。导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多，但基本上可分为物理和化学两个方面。物理。紫外分光光度法怎么计算、维生素C 的含量 1.购买VC标准品，配制一系列一定浓度（被测试浓度左右）的标准溶液，测试它们的吸光度/透光率；2.将所得的数据计算得到一条标准曲线，可以通过EXCEL直接拟合；3.测试仪待测VC样品，通过标准曲线计算样品VC浓度.求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收，在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克)，但核酸在260 nm处的吸收更强，其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍；而蛋白质则相反，其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时，可用215nm与225 nm吸收值之差，通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱，与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50～500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液，测定238 nm的光吸收值A238，以A238为纵坐标，蛋白质含量为横坐标，绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料：紫外分光光度法原理光谱法（spectrometry）是基于物质与电磁辐射作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法；或。

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