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流式胞内染色固定液的作用 用流式细胞仪双染色法测凋亡细胞应用什么固定液

2020-10-12知识8

dil染细胞膜可以固定之后染色么 dil染细胞膜可以固定之后染色对细胞膜染色需要的染料如下:DiO(细胞膜绿色荧光探针),呈现绿色荧光。荧光素双醋酸酯(FDA),绿色荧光。细胞染色方法:PI(Propidium Iodide。

流式胞内染色固定液的作用 用流式细胞仪双染色法测凋亡细胞应用什么固定液

请教,用于流式细胞术的固定液 这要看您做什么实验,如果是dna的pi,那么当然可以用75%或80%的冰乙醇。但如果要做Annexin V or API等,那么就不能固定了,因为这样会影响表面的特异性分子,造成后期染色剂不能很好的固定到细胞表面。如果明天就可以修好流式,那么做API可以先染色,明天上机。如果做其他表面分子如Annexin V或cd的,只能重做了,因为固定后效果太差!

流式胞内染色固定液的作用 用流式细胞仪双染色法测凋亡细胞应用什么固定液

做流式细胞仪之前,如何固定细胞? 一 般来说都是将细胞悬液离心并弃上清后加入固定液,我们加的是70%的冰乙醇,加的量根据你细胞的多少.你这个涉及的测蛋白,那么加多聚甲醛的量和时间可能 要控制得严一些才能保证最低限度不破坏a-SMA的结构.如果单测细胞凋亡和周期的话固定液多一点和固定时间长一点都影响不是太大.\\x0d其实无论是做细胞周期 的乙醇固定,还是做蛋白染色的多聚甲醛固定,固定液加1mL就可以了,一般每个样品的细胞数都在106左右.固定液太少了不好,因为固定液的实际作用浓 度一定程度上受弃上清后管内残留液体量的影响,但太多了也没有意义.也正是这个原因,实际上多聚甲醛的浓度用4%的多一些,而且因其有挥发性,时间长浓度 会有所降低.至于固定时间,一般4度30min固定作用就已经比较完全了,但是也可以放置过夜,这样有时有利于时间安排.

流式胞内染色固定液的作用 用流式细胞仪双染色法测凋亡细胞应用什么固定液

做流式细胞仪用什么固定液 你的双染色是什么方法呢,测凋亡的方法有很多种的。大部分都是用活细胞,如果用到固定的,那是要测细胞内部的被活化的caspase了。推荐使用多聚甲醛,对抗原的保存性好,。

#流式细胞仪#dna

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