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葡萄糖氧化酶法测葡萄糖方程 邻联甲苯胺和葡萄糖发生反应吗

2020-10-11知识31

简述尿干化学检测中酮体的原理 尿的干化学2113试带可检测的项目有5261蛋白质、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、4102尿胆原、亚硝酸盐、比重、PH值等。1653(1)蛋白质(PRO):PH指示剂蛋白误差原理。干化学试纸中含有溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统及表面活性剂,其中溴酚蓝的PH阈为3.0-4.6,在PH3.2时会产生阴离子,与带阳离子的蛋白质结合后产生颜色反应,本试剂只适合于白蛋白的检测,球蛋白浓度高时呈弱阳性。(2)隐血(BLD):血红蛋白中含有血红素基团,具有过氧化物酶活性,可使试带中的过氧化物(如过氧化氢茴香素)放出新生氧,将邻联甲苯胺受体氧化成蓝色化合物。本试带不能区分血红蛋白和肌红蛋白,与血红蛋白起反应时呈均匀的绿-蓝色;与红细胞起反应时呈斑点状绿-蓝色。(3)葡萄糖(GLU):葡萄糖氧化酶法。试纸中含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、缓冲剂及显色原。尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下,天生葡萄糖酸内酯和过氧化氢,后者在过氧化物酶的催化下使色素原(如邻联甲苯胺、碘化钾等)氧化而呈色。(4)酮体(KET):尿酮体包括乙酰乙酸、丙酮和β-羟丁酸。含酮体的尿液中加亚硝基铁氰化钠后,与氨液接触时出现紫红色环。(5)白细胞(LEU):粒细胞中存在酯酶,能作用于试纸中。

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邻联二茴香胺的氧化有几个电子转移 邻联二茴香胺bai的氧化du有几个电子转移测定葡萄zhi糖氧dao化酶(GOD,E.C.1.1.3.4)最广泛使用版的方法,是利用权葡萄糖氧化酶—辣根过氧化物酶—邻联茴香胺偶联反应,用分光光度法测定;但邻联茴香胺是致癌物,有必要选择毒性较低、灵敏度较高的新染料代替之。国外曾有报道,邻联甲苯胺、邻甲苯胺及2,6-二氯苯酚等一些染料可作为邻联茴香胺的代用品,但前二种仍有致癌性。国内虽有利用GOD酶法、用4-氨基安替比林偶联酚测定血清中葡萄糖含量(Trinder反应)的报道,并指出Barham及Trinder1972年提出用2.4-二氯苯酚代替酚,灵敏度更高,但直接用以测定GOD活性的方法尚未见报道。本文根据Trinder反应原理,选用2,4-二氟苯酚和苯酚共同做为该偶联反应的氧供体。

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葡萄糖的测定实验中空白实验有何作用是什么 葡萄糖的测定实验中空白实验有对照作用:做空白对照目的于让有同样条件下结果对比,于便于分析试验的影响因素。葡萄糖的测定过程(仅供参考)1.原理葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质,该有色物质在625 nm波长下与葡萄糖浓度成正比。通过侧定蓝色物质的吸光度值可计算样品中葡萄糖的含量。2.仪器①实验室常用设备。②722型分光光度计。3.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。①三氯乙酸(40%):称取4.0 g三氯乙酸,用水溶解并稀释至100 mL。②无水乙醇。③2 mol·L-1NaOH溶液:称取8 g NaOH,用水溶解并稀释至100 mL。④1%邻联甲苯胺溶液:称取0.1 g邻联甲苯胺溶解于10 mL无水乙醇中,倒人棕色瓶中,4℃冰箱保存。⑤乙酸缓冲液(pH5.O):称取14.28 g乙酸钠(CH。COONa.3H20)溶于水中,加入2.7mL冰乙酸,使pH为5.O,用水定容至1L。⑥葡萄糖氧化酶溶液:称取一定量的葡萄糖氧化酶(Sigma公司)用水溶解,使酶含量为100U/mL。4℃冰箱保存一周。⑦过氧化物酶溶液:0.010 g辣根过氧化物酶溶于10 mL7J(~,4℃冰箱保存一周。⑧酶溶液:取100 mL乙酸缓冲液,分别加入。

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#葡萄糖氧化酶#健康#葡萄糖#茴香#过氧化氢

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