PCR跑胶，目的条带很亮，但是边沿不清楚，前后有拖尾现象，请教各位是什么原因？ 博凌科为-为你解答：1模板可能有降解，建议避免反复冻融，放置时间不能太长。模板的质量是最重要的。2抽提RNA时有污染，包括基因组DNA污染和蛋白质污染，需重 做抽提。3提高退火温度，减少非特异性扩增。4减少循环次数，减少非特异性扩增。5电泳缓冲液时间太长，ph值和盐离子浓度明显 改变。6电泳时电压不能太高，8V/cm。7一般来讲，基于promega和TaKaRa的PCR反应体系中，Mg和dNTP的浓度是相 匹配的，不需改动。8 加样量过大。过多的量会造成加样孔超载，从而导致拖尾和弥散，对于较大的DNA此现象更明显。9制胶过程中胶孔没 制好。10 EB没有冲洗干净。11模板混有基因组DNA，或模板中混有蛋白。12非特异反映。引物设计的不好，非特异，这种情 况容易出现非特异扩增造成有非特异性扩增带或拖尾现象。13电泳液用久了不换，电泳胶脏了。14扩增的条件不合适，一般退火温度低时容 易使引物在非特异位置结合引发扩增反应造成拖尾。针对以上情况，可以先提高退火温度试试，如果实在不行，再看看引物是不是合适。如果 内参可以扩出来，只能说明程序可能是适合的，但不能完全说明体系合适。体系内的各组分，如模板、dNTP、Mg离子、引物等都可能造成拖尾。先得考虑换了 那种成分。
DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾的原因是什么 电泳出现拖尾现象2113，英文成为smear，就是5261弥散.其原因，主要从以下两4102个方面考虑：1、PCR产物1653自身原因：往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物 过多.对策：①减少Taq酶的量，或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量，减少引物的用量，减少循环次数，提高退火温度.2、电泳体系的问题：（1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染，建议更换缓冲液.（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样.（3）电压太高.（4）适当把你的胶的浓度加大.（根据你的片断大小而定）（5）观察你的marker是否也存在拖尾现象，作为对照.以前有挺多人问过这个问题了 借用下以往问题的最佳答案
ISSR-PCR 跑胶条带问题 你好，希望我的经验能给你提供帮助不知道你用什么设计的引物，但不管什么软件应该在你设计的时候都会给你了引物的信息，比如引物得分，有无错配，发卡结构等等。对于875，877的情况在跑PCR的时候经常会遇到，对于这种情况我一般采取的方法是降低退火温度（可以降低的狠一点），让它至少能出现873那样的条带，然后逐步提高退火温度从而得到特异的条带。具体还有什么问题你可以问我。PS：PCR有时候很看脸，拜拜月亮也许比错~
求助啊~~~PCR完跑条带还感觉正常，为什么测序老是不对！！快疯了~~ PCR跑完电泳看看条带的分子量大小是否和预期一致。正常的话测序，不知道你说的测序有问题具体是怎么有问题，是杂峰？多克隆位点？序列不是预期序列？还是其他？是不是每次都是同一个问题？我也遇到过测序结果回来就是一大段都是前后引物不断斜街重复的序列，结果重新测一次就好了，测序公司的问题也是有可能的。
pcr产物跑胶条带不清楚，有一点扩开。是primer有问题吗，还是模板量不够。 楼上说的很好了 我补充一下：1）cDNA中GC含量，一般GC含量过高的cDNA很难PCR 如果不行你可以加入某些添加剂，例如DMSO或者甜菜碱 2）另外巢式PCR应该也很适合解决你的问题 。
PCR跑胶条带跑不开始怎么回事 1、有蛋白污染：酚氯仿异戊醇抽提一下即可；不过一般PCR产物有那么大量的蛋白污染的可能性不大2、PCR体系没有问题吗？PCR泳道中，凝胶的底端有带吗？
pcr产物跑胶条带不清楚，有一点扩开。是primer有问题吗，还是模板量不够。 楼上说的很好了 我补充一下：1）cDNA中GC含量，一般GC含量过高的cDNA很难PCR 如果不行你可以加入某些添加剂，例如DMSO或者甜菜碱 2）另外巢式PCR应该也很适合解决你的问题 没有了
pcr产物在电泳仪中跑胶出现拖尾现象是怎么回事
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾？ 看里的答案里提到PCR产物自身原因：往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退…
PCR跑胶条带为什么这个样子 什么时候跑的？
