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紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? 紫外分光光度计常见的定量方法

2020-10-11知识13

紫外分光光度计的使用步骤是什么? 开机自检预热,主要设置狭缝,自动样品架控制,数据存储调用打印,测试光度、定量、光谱扫描、动力学测量、蛋白质测量。说起来简单,建议您可以联系下紫外的专业供应商 京东7G旗舰店或者青岛法特科技,很快就学会操作了,各品牌他们都很精通。????????????????????????微波消解样品,通常宜用小功率分多步的程序升温升压的模式进行消解。理想的微波消解程序是尽量在最低温度下达到迅速分解样品基体中主要组分的目的。了解样品基体中的各组分,对于确定分解的最有效温度是必要的。了解消解特性和样品组分与不同试剂间的互相作用,可使分析工作者更容易控制样品的消解过程。对于不同的有机或无机样品,酸消解时化学反应在各温度点的剧烈程度和物理当量的变化是不同的。有机样品糖类、蛋白质和脂类是动植物样品的三个基体成分。蛋白质在约150℃下迅速分解,三硬脂精约160℃才分解。在175℃以后没有断裂的有机键是苯环中的π键及芳香氨基酸。一般以硝酸消解有机样品成分的临界温度如下:淀粉等碳水化合物,140℃;蛋白质类,145℃~150℃;糖类,150℃;类脂、脂肪类,>;160℃~165℃;重油类、石油、沥青,>;180℃~6489。

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紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;2113T为透光率;E为吸收系数,采用的5261表示方法是(E1%1cm),其物理意4102义为当溶液浓度为16531%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。

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使用紫外分光光度计,如何用标准曲线进行单组分定量分析?

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紫外分光光度计的使用步骤是什么? 仪器名称:紫外/可见分光光度计系统使用方法:开机步骤1 开光谱仪电源2 开计算机电源3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标,此时出现UV WinLab的应用窗口,仪器已准备好,可选用适当方法进行分析操作.2 方法:在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数,这些参数的组合就形成一个“方法”.Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法.1)扫描(SCAN),用以进行光谱扫描.2)时间驱动(TIME DRIVER),用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化,如酶动力学.3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化,并可以计算这些纵坐标值的差或比值.4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度.2.1 进入所需方法,在方法窗口中选择所需方法的文件名.2.2 方法的设定2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动各项方法可根据显示的参数表,逐项按需要选用或填入,并可参考提示.2.2.2 浓度浓度方法窗口下方标签较多,说明做浓度测定时需要参数较多.用鼠标指按每一标签,可翻出下页,其上有一些需要测定的参数.必须逐页设定.3 工具条3.1 SETUP当所需的各项参数都已在参数中设好后,必须用鼠标指按SETUP,才能将仪器调整到所设状态.3.2 AUTOZERO用鼠标指按此。

如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。。

紫外可见分光光度法的定性,定量分析的依据是什么 其依据为当光穿过被测2113物质溶液时,物5261质对光的吸收程度随光的波长4102不同而变化。紫外1653-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或分为原子光谱法和分子光谱法;或分为能级谱,电子、振动、转动光谱,电子自旋及核自旋谱等。分光光度法是光谱法的重要组成部分,是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度,对该物质进行定性和定量分析的方法。常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。扩展资料:对溶剂要求:含有杂原子的有机溶剂,通常均具有很强的末端吸收。因此,当作溶剂使用时,它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外,当溶剂不纯时,也可能增加干扰吸收。因此,在测定供试品前,应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求,即将溶剂置1cm。

紫外可见分光光度计定量分析的原理和方法是怎样的 为了能够满足紫外区和可抄见区需要使用氘灯和钨灯两种光源。钨灯波长1100-360nm左右,氘灯190-400左右。分光部分一般使用平场光栅,然后单色器最经典的是平行C-t系统。之后就是外光路了,根据不同的百仪器使用不同的外光路。分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射下,产生了对光吸收的效应,物度质对光的吸收是问具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系答,也即符合比色原理—比耳定律

紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量? 根据朗2113伯比尔定律得出:当一束平行5261单色光通过一定液层厚度的有色溶4102液时,由于溶质吸收了1653光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多。如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。于是,我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)故m2=(A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。扩展资料:在分光光度分析中,比尔定律是一个有限的定律,其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等,无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射;入射光为单色平行光。导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多,但基本上可分为物理和化学两个方面。物理方面主要是入射光的单色。

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