变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳的上样缓冲液一样不？
琼脂糖凝胶电泳具体操作步骤是什么？需要注意什么事项？ 一。操作步骤：21131、电泳方法一般的核酸检测只需要琼脂5261糖凝胶4102电泳1653就可以；如果需要分辨率高的电泳，特别是只有几个bp的差别应该选择聚丙烯酰胺凝胶电泳；用普通电泳不合适的巨大DNA链应该使用脉冲凝胶电泳。2、凝胶浓度对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2%之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。3、缓冲液常用的缓冲液有TAE和TBE，而TBE比TAE有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。4、电压和温度电泳时电场强度不应该超过20V/cm，电泳温度应该低于30℃，对于巨大的DNA电泳，温度应该低于15℃。5、DNA样品的纯度和状态注意样品中含盐量太高和含杂质蛋白均可以产生条带模糊和条带缺失的现象。乙醇沉淀可以去除多余的盐，用酚可以去除蛋白。6、DNA的上样正确的DNA上样量是条带清晰的保证。注意太多的DNA上样量可能导致DNA带型模糊，而太小的DNA上样量则导致带信号弱甚至缺失。7、Marker的选择DNA电泳一定要使用DNA Marker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小。Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的，这样对。
跑完琼脂糖电泳不小心把一滴缓冲液滴到身上，没及时洗掉，琼脂糖胶里的gold view，有多大危害？ 一点事没有。别说gold view，当年用EB染色的时候，都经常直接下手去抓胶。gold view的毒性比EB小得多，洗个手就没事了。
