酶标仪 怎么配置340nm滤光片 目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有最大吸收,当pH值降为L 0时,最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大 一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,其他滤光片可根据自己的需要选择。有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标。
水质检验余氯使用四甲基联苯胺 为什么用盐酸配制,其他酸可以吗? 一般不用其他酸,苯胺类物质有还原性,-NH2易被氧化.其他酸会把四甲基联苯胺的-NH2氧化,如硫酸、硝酸.
邻联甲苯胺与3,3,5,5四甲基联苯胺作用一样吗 联邻甲苯胺金、铈、游离2113氯的光度测定。测定硝酸5261盐4102、锰、亚硝酸盐、铬盐、铜盐、钴、汞和空气1653中的氰离子。分析标准品是测定金和游离氯的灵敏比色光敏。邻联甲苯胺侵入途径:吸入、食入、经皮吸收。健康危害:本品对呼吸疲乏和眼有刺激性。对皮肤无刺激性;易经皮肤吸收。慢性影响:无长期职业性接触致慢性影响的报道。动物喂饲本品可导致肾损害甚至肾功能衰竭。
配制的四甲基联苯胺溶液为什么会变成黄色的 恐怕是被氧化成类似于肼的结构了吧,四甲基联苯胺很容易被氧化的,尤其是在有酶的时候。就像苯酚可以被氧化成醌一样,形成了大的共轭体系,导致出现颜色并进一步变深。
免疫组化中,一抗、二抗的制备方法?原理? ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。(一)原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牵9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体—聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。(二)操作步骤方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1.包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应。
DPD硫酸盐的CAS号到底是哪个? 测余氯要买些试剂,用的DPD硫酸盐,在国内网站查到两个CAS号,6065-27-6和6283-63-2,是哪一个呢?化学结构式我看着一模一样啊。DPD硫酸盐的化学名称为N,N-二乙基-1,4-。
四甲基联苯胺的介绍 四甲基联苯胺是一种化学物质,化学式是C16H20N2。
四甲基联苯胺的应用 TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为450nm。ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用
邻联苯胺与邻联甲苯胺是不是同一种试剂? 一个是苯胺,一个是甲基苯胺,肯定不是一个化学物质。邻联苯胺就是联苯胺,邻联甲苯胺,苯环上面分别多了一个甲基。
配制四甲基联苯胺溶液为什么会有沉淀 工作中需要!联苯胺不溶于冷水啊,在热水中能溶解。可以利用热水先溶解后再冷却就可以制取饱和溶液