如何制作高效率的大肠杆菌感受态细胞？ 首先要有好的大肠杆菌感受态种子，一般买一管商业化的也不贵挺多十几块钱。参考分子克隆的步骤进行大肠杆菌感受态的制备。具体步骤如下：1 划线，商业化的大肠杆菌种子在无抗性的LB平板划线，37摄氏度过夜培养。2 挑取单克隆，于50ml LB培养基中培养，37℃，220rpm培养大约7～8小时。3 测一下OD600～0.6-0.8，先将菌液冰浴10分钟，4℃离心收菌，4500rpm，10分钟。4 洗涤细胞：弃掉上一步的上清，用5ml盐溶液(氯化钙和氯化镁混合液)重悬细胞，冰浴10分钟。5 离心4℃，4500rpm，10分钟，收集细胞，弃上清。用1.5ml细胞保存液(氯化钙和甘油)重悬细胞。6 分装，将上述重悬液分装每个100微升。先用液氮速冻，然后保存于-80摄氏度备用。注意：以上操作在无菌低温条件下操作，以上是化学法转化感受态，若要制备电转感受态，步骤4和5全部改用10%甘油溶液。
感受态细胞的制备及转化平板上菌落的多少跟什么原因相关 感受态细胞的制备及转化平板上菌落的多少主要与两个方面有关：一是感受态的质量；二是质粒与感受态的比例（如果是连接产物。就要看连接效率的高低了）
感受态细胞的制备时有什么注意事项 方法一：细菌转化的方法多以Mendel和Higa（1970）的发现为基础，其基本方法是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌，使之进入感受。
如何提高大肠杆菌感受态细胞的转化效率 注入刺激激素 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 准备：一.材料 e.coli dh5α菌株：rˉ，mˉ，ampˉ；pbs质粒dna：购买或实验室自制，eppendorf管。二.设备 恒温摇床，电热恒温。
感受态细胞涂平板 什么菌落都没有长出来 请教高手 首先，确保你的连接是成功的，碰到过有师弟没加连接酶，连接失败的情况；其次，转化过程操作是否正确，看你写的东西，连接液和感受态放在一起培养是个什么情况？第三，如果要检测感受态是否失活，在第二步确保无误码的情况下，转化时加入阳性对照，拿个纯质粒同时转，如果纯质粒都不长，那感受态必然有问题。
做平板支撑的时候身体抖得很厉害是为什么？
谁做过酶切质粒的实验啊，制感受态细胞然后转化呢？求详细过程及注意要点。大肠杆菌电转化感受态细胞制备 第一天：1.将适合菌株(如XL1-Blue，DH5α)置于LB或其他营养丰富的培养。
如何按需选择培养基及其接种方法 选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参 考文献，或在购买细胞株时咨询。。
