农杆菌转化法的步骤 最低0.27元/天开通文库会员,可在文库查看完整内容>;原发布者:lbyin0731农杆菌的转化流程方案一1.农杆菌的培养及感受态的制备①农杆菌菌株划YM平板,26-28℃培养48h;②挑取单菌落接种到40ml无抗生素的YM液体培养基中,250r/min,26-28℃悬浮培养12-16h;③将菌液转入灭过菌的50ml离心管中,4℃,8000r/min,离心8min;④弃上清,加入用100mMNaCl(4℃预冷)重悬收集的农杆菌;⑤4℃,8000r/min,离心8min;⑥弃上清,加入原始菌液1/50体积(800l/管(此时的感受态农杆菌可以直接用于转化)并分装成100l)的20mMCaCl2重悬菌体;⑦置液氮中10s,放入-20℃冰箱中保存备用。2.农杆菌的转化(冻融法)将感受态农杆菌置于冰上,加入1g质粒DNA(体积不宜超过10l),充分混匀,冰上放置30min;②置液氮中快速冷却约1min后迅速转入37℃水浴中,待其融化;③加1ml无抗生素的YM液体培养基于28℃,230r/min培养2-4h;(或直接用1mll,留500l于管中④3000r/min离心2min收集菌体,将上清吸去500培养菌直接涂布含抗生素的YM平板);⑤重悬菌体并涂布到含有适当抗生素的YM平板上吹干,28℃培养48h;⑥挑取单菌落接种到筛选液体YM培养基中,28℃,250r/min培养48h,将菌液用于保存或转化;注:。
拟杆菌属的分类 拟杆菌科的1属。又称类杆菌属。为革兰氏染色阴性、无芽胞、专性厌氧的小杆菌。正常寄居于人和动物的肠道、口腔、上呼吸道和生殖道。因长期应用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂等,而使机体免疫功能紊乱或菌群失调时,能导致内源性感染。菌体呈球杆状,多数无鞭毛,硝酸盐还原阴性,过氧化氢酶阴性,分解蛋白胨或葡萄糖,产生琥珀酸、乙酸、甲酸、乳酸和丙酸等。少数种产生暗黑色色素。DNA中的G+C克分子含量为40~50%。根据生化反应、色素等的不同分22种,比较重要的是脆弱拟杆菌、产黑色素拟杆菌。脆弱拟杆菌 菌体大小(0.5~0.8)×(1.5~4.5)微米。单个存在或两端相连。在陈旧培养基中呈多形性,有长丝状出现。无动力,氯化血红素和10~20%胆汁能促进其生长。在肉汤培养基中呈均匀混浊生长,有白色沉淀物。对葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、糊精等均发酵,产酸产气。耐青霉素和卡那霉素,对红霉素和利福平敏感。DNA中的G+C克分子含量为44~45%。有内毒素。对豚鼠进行皮下注射可形成脓疡,对家兔进行静脉注射引起死亡。本菌主要存在于肠道,比肠内的大肠杆菌多100~1000倍。在临床标本中,为阑尾炎和败血症的常见菌,也可从肺或肝脓肿、转移性脓肿、尿路感染排泄物中分离。
厌氧菌感染口臭!请问医生,在月经期时,后两天外阴有些痒,不知那会是什么病菌?现这种现象可以用甲硝唑阴道泡腾片吗?还有厌氧菌是什么菌?
类杆菌属属于哪一类细菌?革兰染色阳性菌还是阴性菌? 概念拟杆菌属(Bacteroides)是指革兰氏染色阴性、无芽孢、专性厌氧的小杆菌。又称类杆菌属。拟杆菌属对人体器官的感染部位正常寄居于人和动物的肠道、口腔、上呼吸道和生殖道。比较重要的是脆弱拟杆菌和产黑色素拟杆菌。脆弱拟杆菌的菌体大小(0.5~0.8)微米×(1.5~4.5)微米,单个存在或两端相连,主要存在于肠道,比肠内的大肠杆菌多100~1000倍,在临床标本中,为阑尾炎和败血症的常见菌。分类拟杆菌科的1属。又称类杆菌属。为革兰氏染色阴性、无芽胞、专性厌氧的小杆菌。正常寄居于人和动物的肠道、口腔、上呼吸道和生殖道。因长期应用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂等,而使机体免疫功能紊乱或菌群失调时,能导致内源性感染。菌体呈球杆状,多数无鞭毛,硝酸盐还原阴性,过氧化氢酶阴性,分解蛋白胨或葡萄糖,产生琥珀酸、乙酸、甲酸、乳酸和丙酸等。少数种产生暗黑色色素。DNA中的G+C克分子含量为40~50%。根据生化反应、色素等的不同分22种,比较重要的是脆弱拟杆菌、产黑色素拟杆菌。脆弱拟杆菌 菌体大小(0.5~0.8)×(1.5~4.5)微米。单个存在或两端相连。在陈旧培养基中呈多形性,有长丝状出现。无动力,氯化血红素和10~20%胆汁能促进其生长。在肉汤培养基中呈。
红霉素,青霉素和金霉素之间的区别是什么?
如何增加肠道有益菌,有益菌一般是指在人体肠胃生长的、对人体健康起到正面作用的细菌。在人的肠道里保持较多数量的有益菌群,将非常有利于维持身体健康。。
厌氧菌有哪些? 根据对O?的耐受程度,可将厌氧菌分为三大类:(1)对氧极端敏感的厌氧菌:代表菌种为月形单胞菌,这类细菌对厌氧条件要求很高,在空气中暴露10min即死亡,临床上很难分离。
怎么做细菌培养?
帮我分析一下这个菌可能是哪个属的? 都是节细菌属节细菌属一)常见细菌初步检索表在好氧条件下一般培养基上常见细菌的初步检索表1.细胞始终为球状菌 2幼龄细胞非球状,而是杆状或螺旋状 62.在无氮培养基上生长良好,能固定大气氮固氮菌科(Azotobacteraceae)需要无机氮或有机氮才能生长 33.革兰氏染色阴性,有体液时才生长良好奈瑟氏球菌科(Neisseriaceae)革兰氏染色阳性到革兰氏染色不稳定;在肉汁胨培养基或酵母膏葡萄糖培养基上生长 44.细胞成链、成对、少数为四联状,产乳酸,接触酶阴性乳酸细菌科(Lactobacillaceae)的链球菌族(Streptococceae)细胞不明显成链,不产乳酸 55.细胞大小不均一,形状不甚圆,有的有棱角,排列不规则。有类似出芽繁殖者 芽生球菌属(Mycococcus)细胞大小比较均一,排列成单个、成对、四联、八叠、或不规则的堆团。微球菌科(Micrococaceae)6.球状细胞萌发成杆状,革兰氏染色阴性或不定;老培养物则又转为类球菌状,多呈革兰氏染色不定或阳性。杆状菌呈多形态,形状不规则节细菌属(Arthrobacter)幼培养物与老培养物无上述特征 77.细胞杆状 8细胞螺旋状或弧状 螺菌科(Spirillaceae)8.幼培养革兰氏染色阳性 9幼培养革兰氏染。