紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;T为透2113光率;E为吸收系数,采用的表5261示方法是(E1%1cm),其物理4102意义为当溶液1653浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。为什么使用280nm紫外吸收法测定蛋白质取决于完整肽键? 蛋白质在紫外光范围内两处有吸收峰:一是由于其含色氨酸残基和酪氨酸残基,其分子内部存在着共轭双键,在280nm处有一吸收峰;二是因肽键存在而引起的,在200~220nm处有一吸收峰.此两处吸收峰都可用于蛋白质的定量测定,但以前者为常用.210nm是什么物质的吸收峰 一般是甲醇,另外,有机酸在210nm处也有很高的吸收峰请问,哪些物质在254nm没有吸收峰?或者很小的吸收峰,但在210nm又有很大吸收呢? 254是苯环吸收,所以没有苯环是前提;210就多了,二烯烃,炔和羰基都有这样的话:乙炔、丙炔等都差不多;丁二烯也差不多;带羰基的比如丙酮也很接近
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