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比较紫外-可见分光光度计与可见分光光度计有什么不同 紫外分光光度计250nm

2020-10-06知识10

可见分光光度计与紫外分光光度计有什么区别?以及各种部件的区别? 紫外分光光度计与紫外可见分光光度计的区别在于:紫外可见分光光度计测量的范围大些,由于各种不同光波发射的灯管不同,紫外分光光度计和紫外可见分光光度计所用就不同。。

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比较紫外-可见分光光度计与可见分光光度计有什么不同 原发布者:noted77 可见分光光度计 与紫外可见分光光度计的区别可见分光光度计与紫外可见分光光度计的区别是测定波长范围不同,紫外一般用氢灯,测定波长范围180~350nm,。

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紫外可见分光光度法的定性,定量分析的依据是什么 其依2113据为当光穿过被测物质溶液时5261,物质对光的吸收程度随光4102的波长不同而变化。紫外-可见分1653光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。光谱法(spectrometry)是基于物质与电磁辐射作用时,测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法;或分为原子光谱法和分子光谱法;或分为能级谱,电子、振动、转动光谱,电子自旋及核自旋谱等。分光光度法是光谱法的重要组成部分,是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度,对该物质进行定性和定量分析的方法。常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。扩展资料:对溶剂要求:含有杂原子的有机溶剂,通常均具有很强的末端吸收。因此,当作溶剂使用时,它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外,当溶剂不纯时,也可能增加干扰吸收。因此,在测定供试品前,应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求,即将溶剂置1cm。

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紫外光吸收法测定蛋白质浓度时,为什么要同时测定280nm及260nm的吸光度 紫外吸收检测2113DNA浓度与纯度2007年11月13日5261 星期二 11:40目的:了解紫外吸收检测DNA浓度与纯4102度的原理,掌握测定方法.原理:1653 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链 寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值(OD260/OD280),估计核酸的纯度.纯净DNA的比值为1.8,RNA为2.0.若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除 尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低.270nm存在高吸收表明有酚的干扰.紫外分光光度法只能用于测定浓度 大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法.试剂与仪器:提取的质粒DNA,紫外分光光度仪.操作步骤:1)分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零.2)取质粒DNA样品2μl,用水稀释100倍,转入分光光度计的石英比色杯中.3)在260nm和280nm分别读出样品光密度值.如果样品浓度单位为μg/μl,则样品DNA浓度为OD 值的10倍,即如 OD260=0.1,则样品浓度即为1μg/μl.4)若OD260/OD280大于1.8,说明仍有RNA,可以考虑用RNA酶处理样品,若小于1.8,说 明样品中含有蛋白质或酚,应再用酚/氯仿抽提,以乙醇沉淀纯化。

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