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做DGGE胶时可不可以先插梳子再灌胶?? 蛋白胶插梳子

2020-10-06知识11

用PAGE胶跑DNA用PAGE胶跑DNA的话,那和western blot中跑蛋白的胶有何不同?例如胶的配法、浓度、上样量、用多少电压等,而且marker没有颜色,怎么知道跑到了哪里?谢谢! 首先原理差不多,具体细节差异还是有的。跑DNA的话,可以参见 人家做AFLP的protocol,当然也要看你想分离的片断大小咯。两者都要用到丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺、TEMED、APS(10%)但是跑DNA一般用 TBE(Tris、硼酸、EDTA),还含尿素 用于western的蛋白胶多用 Tris-HCl,SDS buffer。蛋白较一般有分离胶和浓缩胶。浓度看分离的东西;上样量的话其实没法比较,染色的方法不一样,DNA银染的话少上点,具体多少我也记不清了,自己查一下吧;如果说是上样体积,看你的梳子大小咯 电压:AFLP要求DNA要预电泳,冲洗掉尿素后再插梳子,60W 2h;当二甲苯青跑到底部约1/3处终止电泳。DNA的loading buffer含染料 溴酚蓝、二甲苯青等来指示跑到哪里呢。

做DGGE胶时可不可以先插梳子再灌胶?? 蛋白胶插梳子

据说跑蛋白胶实验有毒性,对实验员身体有影响,是否属实?请内行人员为外行人员解惑,万分感谢。 我女朋友是生物类研究生,跑蛋白胶实验是她工作一部分,今天偶然听说这种实验可能有毒性,十分紧张,问她…

做DGGE胶时可不可以先插梳子再灌胶?? 蛋白胶插梳子

做DGGE胶时可不可以先插梳子再灌胶?? 一般从中间灌胶,要是插上梳子岂不是要从一侧灌了?这样出来的胶的梯度可能不是水平而影响最后的图谱.话说为什么要这么做呢?

做DGGE胶时可不可以先插梳子再灌胶?? 蛋白胶插梳子

蛋白胶拔梳子时上下层胶之间出气泡 你是说拔梳子的时候,分离胶和浓缩胶之间裂开了?你轻点拔…慢慢地,慢慢地,把梳子拔出来。两胶之间有点裂开没关系,重新合起来,再跑,问题也不大,但是这一定要在缓冲液中,不要有气泡。

1.0 mm 10孔的梳子适合加多少ug蛋白量 那要看你做胶的时候用的是什么型号的梳子了,齿宽的梳子当然能上样的量就更大了,而且也跟胶的厚度有关,我知道的现成的玻璃板有1mm和1.5mm厚的。一般做胶都是有模具的啊,宽度都是固定的。

做western blot配胶时,梳子的齿要正好碰到分离胶吗?

蛋白质电泳时插梳子后总会有一端的一个尺子出现气泡 插梳子的时候要从一端开始插,要倾斜,不要竖着这插.这样气泡就能从另一端跑出.

用PAGE胶跑DNA 首先原理差不多,具体细节2113差异还是有的。5261跑DNA的话,可以参见 人家做AFLP的protocol,当然也要看4102你想分1653离的片断大小咯。两者都要用到丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺、TEMED、APS(10%)但是跑DNA一般用 TBE(Tris、硼酸、EDTA),还含尿素用于western的蛋白胶多用 Tris-HCl,SDS buffer。蛋白较一般有分离胶和浓缩胶。浓度看分离的东西;上样量的话其实没法比较,染色的方法不一样,DNA银染的话少上点,具体多少我也记不清了,自己查一下吧;如果说是上样体积,看你的梳子大小咯电压:AFLP要求DNA要预电泳,冲洗掉尿素后再插梳子,60W 2h;当二甲苯青跑到底部约1/3处终止电泳。DNA的loading buffer含染料 溴酚蓝、二甲苯青等来指示跑到哪里呢。

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