碱性蛋白酶纯化

为什么分离与纯化胃蛋白酶要用碱性溶液？ 蛋白质学有个概念叫做“等电点”，等电点是一个pH值，在此pH值时蛋白质溶液的静电荷为0。注意等电点与“最适宜作用的pH值”数值相近，但并不是一个概念。蛋白质有一个性质就是在pH值远离等电点的溶液中，溶解度较高，接近等电点的溶液中溶解度低（当然要在一定范围内）。所以在分离纯化蛋白时，抽提液的pH值要远离目的蛋白的等电点，这样才能溶解更多的目的蛋白，提高抽提效率。又为了避免强酸强碱环境，所以酸性蛋白要用碱性溶剂，碱性蛋白要用酸性溶剂。对于胃蛋白酶，其适宜作用环境是较强酸性，所以它的等电点是pH的（约等于2），是酸性蛋白，要用碱性溶液。有朋友回答“防止自降解”是不对的。因为胃液就是强酸环境，如果能发生自降解，在胃里面早就发生了。在消化食物之前，消化酶就把自己消化了，这是不可能的。胃蛋白酶不具有自己能够识别和降解的区域，也就是说不会自己降解自己。最后说一句，在一定的条件范围内，即使酶失活，也是可以通过改变条件而恢复活性的=)诺贝尔团队·鱼怎么判断蛋白酶是酸性中性还是碱性 水解蛋白质肽2113键的一类酶的5261总称。按其水解多肽的方式，可以将4102其分为内肽酶和外1653肽酶两类。内肽酶将蛋白质分子内部切断，形成分子量较小的月示和胨。外肽酶从蛋白质分子的游离氨基或羧基的末端逐个将肽键水解，而游离出氨基酸，前者为氨基肽酶后者为羧基肽酶。按其活性中心和最适pH值，又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和酸性蛋白酶。按其反应的最适pH值，分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。工业生产上应用的蛋白酶，主要是内肽酶。蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶，主要由霉菌、细菌，其次由酵母、放线菌生产。催化蛋白质水解的酶类。种类很多，重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。蛋白酶对所作用的反应底物有严格的选择性，一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键，如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。蛋白酶分布广，主要存在于人和动物消化道中，在植物和微生物中含量丰富。由于动植物资源有限，工业上生产蛋白酶制剂主要利用枯草杆菌、栖土曲霉等微生物发酵制备。蛋白酶已广泛应用在皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面。。从土壤中分离纯化碱性蛋白酶牙孢杆菌的步骤是什么 该菌的最适产酶时间为48-60h，最适产酶pH位为11．0，最适产酶温度为30-35℃．该菌对氨苄青霉素和硫酸链霉素敏感，而对壮观霉素有抗性 分离可用调节pH值，温度以及用。哪位高手能告诉我，在PCR产物纯化中，蛋白酶K 的作用是什么，以及其原理 感激不尽啊！！！！！！ 觉得应该是灭活Taq酶的，这个原理应该是比较清楚的，不赘述了。用EDTA的话，EDTA是广谱的螯合剂，可以和金属离子结合。在配制PCR的反应物时都会加入镁盐，因为镁是Taq所必须的，EDTA掠夺镁离子，也可以起到灭活Taq酶的作用。蛋白质的酸碱性 是指它所处的溶液的酸碱度碱性蛋白酶能化烂肉吗. 碱性蛋白酶是经细菌诱变方法选育的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等细菌，通过深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶。碱性蛋白酶外观为褐色粉末，有酵曲的特殊臭味。通常用于洗涤剂中。食品中用于肉类嫩化的是木瓜蛋白酶，是从番木瓜中提取的。商品名称“嫩肉粉”。这是一种能使动物性原料软嫩滑润，同时又不损伤肌纤维弹性的佐助料，呈白色粉末状，为纯天然制品。推荐用嫩肉粉，别用碱性蛋白酶。