质粒转染细胞后是整合到基因组中还是游离存在？由表达质粒转录产生的mRNA有poly尾巴吗？ 这要看你用的是哪一种质粒载体，有些质粒就在细胞中进行表达，不整合入基因组中，比如腺病毒类的表达载体；有些质粒上有整合的序列，可以整合到细胞基因组上进行表达。。
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质粒转化、细胞转染步骤 原发布者：Zymecool转化：将质粒DNA或以其为载体构建的重组DNA导入细菌体内使之获得新的遗传特性。转染（transfection）：将含有目的gene的载体转到真核cell内转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程。有时也指在真核cell之间通过逆转录病毒转移和获得cellDNA的过程。1.质粒转染（transfection）6-well-plate每well60-70%时transfection接种时2.5×105个/ml/well质粒DNA转染液优化培养基opti-MEM步骤：2.5ug质粒DNA+200ulopti-MEM+6ul转染液混匀室温静置15min待转染cell换优化培养基opti-MEM1.3ml，切记要轻轻加培养基，勿冲起cell把transfectioncomplex(200ul)轻轻均匀滴入cell培养基中，十字形摇晃plate，混匀37℃，CO2培养箱培养2.转化：外源DNA(质粒作为载体)导入受体细胞（大肠杆菌感受态cell）步骤：50ul感受态cell（一管）加入12ul质粒DNA→轻柔混合↓冰浴30min↓42℃热激90s↓迅速冰浴2min↓向管中加入培养基，混匀后37℃震荡培养（﹤225rpm）1h，使细菌恢复正常生长状态↓涂板正培1h后，倒培过夜
质粒入核后能与组蛋白结合吗 1.进入细胞核。只有进入细胞核，才能进行DNA的复制、转录和翻译过程。2.如果和组蛋白结合，装配成核小体的话，就是整合到染色体的过程了。外源质粒DNA可通过非同源性分子间重组整合进细胞染色体，然后和宿主基因一同完成复制转录过程。但是由于质粒的超螺旋结构决定了整合的几率不是没有，而是很小。这种小概率的事件，可以通过对载体编码抗生素抗性基因的筛选压力来获得整合到染色体的转染株，即稳定转染的过程。如果不施加筛选压力的话，绝大部分是游离在染色体之外瞬时完成了翻译全过程，可以在转染后1-4d检测其转录和表达水平。即为瞬时转染。
