双缩脲法测定蛋白质含量的干扰因素有哪些 1、碱性环境：在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液，再加入氢氧化钠溶液，则无法充分制造碱性环境，此时硫酸铜会与氢氧化钠发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。2、蛋白质浓度：双缩脲法常用于0.5g/L～10g/L含量的蛋白质溶液测定。扩展资料双缩脲法的实验原理：双缩脲是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能够以一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差，不适合微量蛋白的测定。参考资料来源：-双缩脲法参考资料来源：-双缩脲试剂参考资料来源：-蛋白质测定
双缩脲法测定蛋白质的含量实验分析与讨论怎么写？ 双缩脲法测定蛋白质含量的干扰因素有哪些：双缩脲法测定蛋白质含量的干扰因素有三羟甲基氨基甲烷、一些氨基酸和EDTA。双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5~160mg/ml。双缩脲法测定蛋白质含量需注意哪些问题在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。(若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠[NaOH]溶液，则无法充分制造碱性环境，此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。另外，能与双缩脲试剂发生紫色反应的化合物分子中至少含有两个肽键。因此，二肽无法用它来检验。
血清总蛋白测定 双缩脲比色法的原理 有谁知道？ 大鼠血清总蛋白含量测定（双缩脲比色法）一．原理蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成。肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物。测定紫红色络合物的吸光度，能计算总蛋白的含量。二．e799bee5baa6e79fa5e98193e78988e69d8331333330336332目的1．掌握血清总蛋白含量的测定方法。2．观察阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化。3．观察中药对阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化。三．试剂1．总蛋白试剂硫酸铜0.12 mmol/L酒石酸钾钠21.1 mmol/L氢氧化钠0.75 mmol/L2．蛋白标准液：血清白蛋白50g/L四．材料1．试管（100*16mm）3支2．移液器（P20ul、P200ul、P1000ul）各1把3．石英比色皿（1ml）4只五．测定方法单位：ul空白管（b）标准管（std）测定管（s）H2O蛋白标准液（50.0g/L）样品总蛋白试剂10.5105010.5105010.51050混匀，室温放置30分钟，以空白管校零，测定550nm处的吸光度。六．计算总蛋白含量（g/L）＝（测定管吸光度/标准管吸光度）×标准液浓度七．注意事项1．室温放置30分钟后必须立即测定吸光度，否则吸光度会增加。2．实验试剂用量较少，所以加量一定要仔细、准确。
生化实验双缩脲法测定血清总蛋白质中的公式怎么推出来的
双缩脲法测定蛋白质含量的临床意义 (1)正常参考范围：60-80g/L.(2)血浆蛋白质浓度增高：临床上主要见于因各种原因引起的血浆浓缩.(3)血浆蛋白质浓度降低：临床上主要见于严重肝病、肾病、营养不良、血液稀释等.
双缩脲法测定蛋白质含量对标准蛋白有何要求 对标准蛋白应该没要求的，因为标准蛋白都是纯品（如BSA等），然后用水或缓冲液配制.但对样品是有要求的.要求就是不能有对测定有干扰的物质.手头没参考书，只是凭感觉回答一下吧，不一定全.首先就是对双缩脲试剂呈阳性的.
