怎么训练猫不咬人 ？ 猫咪刚买来一个星期。五个月大。刚开始只是假咬手指。现在只要有机会就真咬我腿。手。被咬几次后才给我擦…
western blot 内参 actin 是43还是45 kda 一、为什么要使用内参呢？Western blot除了能证明某样品含有某种蛋白之外，其最为重要的作用是比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少。即为蛋白表达水平最直接的证据。要衡量蛋白的表达水平，前提条件就是等量的上样量。然而如果仅将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法，显然是不可取的。首先各种蛋白质浓度定量方法都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质如DNA的干扰，且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA、Bradford、Lowry等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford法敏感度最高，且与一些列干扰Lowry、BCA反应的还原剂（如DTT、巯基乙醇）相溶，但是对去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western Blot实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。在Western Blot中使用内参。
WB中，培养的悬浮动物细胞的总蛋白质抽提步骤中，为什么要弃去离心后的上清？
做WB为什么用牛奶封闭能显出来 用BSA就显不出来了？ 推荐用TBST进行稀释获得5%的牛奶封闭液（5g/100mL）。很多人的经验是：脱脂牛奶封闭后背景比较干净，而检测磷酸化蛋白则用BSA（因脱脂牛奶含有较多的磷酸化蛋白，会干扰的）9991
小硕一枚，要投医学核心，动物实验的话，只做免疫组化够么？加做WB够么？还要做PCR么？这个有什么规定么 一种也够，不在实验方法的多少，在于文章是否充实，如果指标比较充实，比如说同时研究受体和配体，或同时监测了一个信号通路中的上下游多项指标等等，只做免疫组化投国内核心是没有多大问题的。若是指标单薄，可以再加上WB或PCR。
