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菌株接种平板后到倒置培养吗 什么是影印平板培养法?它有何理论与实践应用?

2020-10-05知识12

为什么采用平板划线分离培养可以分离到纯种细菌

菌株接种平板后到倒置培养吗 什么是影印平板培养法?它有何理论与实践应用?

什么是影印平板培养法?它有何理论与实践应用? 影印平板培养法,是一种能达到在一系列培养皿的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种培养方法历史:1952年,J.Lederberg夫妇的论文《平板影印培养法和细菌突变株的间接选择》,更好地证明了微生物的抗药性是在未接触药物前自发地产生的,这一突变与相应药物环境毫不相干。理论:把长有许多菌落的母种培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木质圆柱印章上,使其沾上来自平板上的菌落。然后可把这一“印章”上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。待这些平板培养后,对各平板相同位置上的菌落作对比后,就可选出适当的突变型菌株。据报道,用此法可把母平板上10%-20%量的细菌转移到丝绒布上,并可利用这一“印章”接种8个子培养皿。实践:通过影印培养法,就可以从在非选择性条件下生长的细菌群体中,分离出各种类型的突变菌种

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培养皿倒完平板,冷却后接种菌液后,放到培养箱,忘记倒置,会不会影响实验结果? 不会,倒置其实主要是方便培养皿拿出来的时候好拿。

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纯化大肠杆菌的实验方案 1.原理:稀释或划线分离,出现单菌落,根据菌株菌落状态挑取所需菌株.2.实验材料:待分离菌株,各种药品3.用具接种环,培养皿,试管,灭菌锅,超净工作台,酒精灯,恒温培养箱4.步骤:配制大肠杆菌琼脂培养基,灭菌,倒平板,取出待分离菌株,在超净台,挑取划线至培养皿,平板倒置于培养箱培养,37摄氏度,一般2天左右.待长出单菌落,挑取所需菌株至斜面培养基,冰箱保藏.5.价值:分离纯化或复壮菌种.

平板划线法的步骤 1.融化培养基:牛肉2113膏蛋白胨琼脂培养基放入5261水浴中加热至融化4102。2.倒平板:待培养基冷却1653至50℃左右,按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1),平置,待凝固。倒平板的方法:右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出,试管或瓶口保持对着火焰;然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完,管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝,迅速例入培养基约15m1,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即为平板。3.作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右(平板转动一定角度约60℃),以便充分利用整个平板的面积,而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行,并可避免此两区线条相接触。4.划线操作(1)挑取他含菌样品:选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量菌种。(2)划A区:将平板倒置于煤气(酒精)灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面,有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖。

微生物实验中的平板冷却倒置是为了避免污染,那倒置过来后水滴不都直接粘到培养基上了吗?还避什么污染啊 倒置后再次翻转过来,即使有冷凝的水珠滴在培养基上也是不会造成污染的,原因如下:1.在倒平板前,平板是经过灭菌处理的2.培养基是经过灭菌处理的3.在向平板内到培养基的时候是在超净工作台和酒精灯的环境下操作的,也不会引入污染.你要明白冷凝水的产生,是因为较热的培养基中蒸发的水分遇到较冷的平板从而产生的,平板、培养基都灭过菌了水滴当然也是无菌的了.

#培养皿#平板#微生物培养基的类型#细菌培养#选择性培养基

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