凯氏定氮中，为什么我的混合指示剂一遇硼酸就变蓝呢？ 我也做过，但从没遇到过像楼主这样的情况.实验中用到的器皿都洗干净；混合指示剂用无水乙醇溶解；可能是买回来的蒸馏水在运输或者贮存过程中被污染了，溶解硼酸换成自己制备的蒸馏水再试试；还有就是在加浓氢氧化钠的时候应防止高浓度的碱溅入吸收液中造成较大的误差.终点应该是灰色或者蓝紫色，楼主再试试，
有谁知道凯氏定氮的具体步骤，注意事项，！！
说明常用蛋白质测定方法的原理，并对各种方法加以比较 1、凯氏2113定氮法准备4个50mL凯氏烧瓶并标号，5261想1、2号烧瓶中加入定量的蛋4102白质样品，另外两个烧瓶作为1653对照，在每个烧瓶中加入硫酸钾-硫酸铜混合物，再加入浓硫酸，将4个烧瓶放到消化架上进行消化。消化完毕后进行蒸馏，全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量，直至指示剂混合液由绿色变回淡紫红色，即为滴定终点，结算出蛋白质含量。2、双缩脲法双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，硫铵不干扰显色，Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成紫蓝色络合物，此物在540nm波长处有最大吸收。利用标准蛋白溶液和双缩脲试剂绘制标准曲线，将待测血清与硫酸钠在待测试管中混合，并只加入硫酸钠不含血清的试管作对照，将两支试管加入等量的双缩脲试剂，混合后于37℃环境中放置10分钟，在540nm波长进行比色，以对照管调零，读取吸光度值，标准曲线上直接查出蛋白质含量。3、酚试剂法取6支试管标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量加入蒸馏水补足而保持一致，混合均匀，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长。
凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量的原理和基本操作方法是什么？ 原理：有机含氮2113化合物与浓硫酸共热5261消化，氮转化为氨，再与硫酸结合成硫4102酸铵。硫酸铵与强碱反应，1653放出氨。将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中，再用标准碱溶液进行滴定。根据测得的氨量，计算样品的总氮量。试剂与材料：浓硫酸、硫酸钾-硫酸铜粉末(称取80g硫酸钾和20g硫酸铜(五水)，0.3g二氧化硒研细混合)、30%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、0.01M标准盐酸、混合指示剂(田氏指示剂)储存液(取50ml0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200ml0.1%甲基红溶液混合，储存于棕色瓶中备用。此指示剂在PH5.2为紫色；PH为5.4为暗灰色或灰色；PH5.6为绿色；变色点为PH5.4)、硼酸-田氏指示剂混合液(100ml2%硼酸溶液，滴加约1ml田氏指示剂，摇匀后，溶液呈紫红色)、蛋白质样品、容量瓶、吸管、凯氏烧瓶、凯氏定氮蒸馏装置、微量滴定管、电炉三、操作方法1、样品处理：固体样品，应在105℃干燥至恒重。液体样品可直接吸取一定量，也可经适当稀释后，吸取一定量进行测定，使每一样品的含氮量在0.2-1.0mg范围内。2、消化：取一定量样品，于50ml干燥的凯氏烧瓶内。加入300mg硫酸钾-硫酸铜混合粉末，再加入3ml浓硫酸。用电炉加热，在通风厨中消化，瓶口加一小漏斗。先以文火加热，避免泡沫。
凯氏定氮法测定蛋白质含量的基本原理 样品与浓硫2113酸和催化剂一同加热消化，使蛋白5261质分解，4102其中碳、氢被氧化为CO2和H2O逸出，而样品1653中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵，硫酸铵用NaOH中和生成NH3`H2O，加热又分解为氨，用硼酸吸收，吸收氨后的硼酸再以标准盐酸或硫酸溶液滴定，根据标准酸消耗量计算蛋白质的含量。
