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培养的细胞计数公式原理

2020-07-16知识11
微生物计数方法有哪些 测定微生物计数的方法有很多,主要有以下几种: 1.血细胞计数法将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数. ①此法的缺点是不能区分死菌和活菌. ②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数. ③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化 2.稀释涂布平板法原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落.培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌. ①这一方法常用来统计样品中活菌的数目 ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落.因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示. ③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定.但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等. ④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法.染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞. 3.滤膜法滤膜法是当... 细胞计数板的计数方法,有4×4小格的4个大格 细胞数(个/ML)=(四个大格的总数/4)*10000*稀释倍数,注意计上不计下,计左不计右 细胞培养液里的细胞怎么计算细胞个数 实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体操作: 1.将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。2.将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。3.计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104 说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为: 1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 (注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液) 细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,用什么方法计,如何操作呢 用血球计数板计数操作步骤: 1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度。2.取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一 小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。5.计数时若计数区是由16个大方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小格)的菌数。如果是25个大方格组成的计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央1个大方格的菌数(即80个小格)。为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定... 谁能给我解释下细胞计数原理和方法,特别是血球计数板 模具,工业生产上用以注塑、吹塑、挤出、压铸或锻压成型、冶炼、冲压等方法得到所需产品的各种模子和工具。简而言之,模具是用来制作成型物品的工具,这种工具由各种零件... 显微镜细胞计数的原理是什么 我根据我做是实验和理解回答一下,血球计数板计数时,我一般会数10个格,因为每个格的边长是1mm,计数区的高度为0.1mm,所以,每个格的体积是0.1立方毫米,10个格就是1立方毫米.如果10个格的细胞总数为x,那么1ml培养基里就有1000x个细胞. 不知道是你想要的答案吗,其实就是整体与部分的概念,你把部分数出来了,然后除以所占的比例就是你要的整体的细胞数. 原代细胞培养实验原理步骤哪里有? 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培 养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。操作步骤(一)胰酶消化法 1、器材:将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死,置75%酒精泡2—3秒钟(时间不能过长、以免酒精从口和肛门浸入体内)再用碘酒消毒腹部,取胎鼠带 入超净台内(或将新生小鼠在超净台内)解剖取肝脏,置平皿中。2、用Hank’s液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。3、用手术剪将肝脏剪成小块(1mm2),再用Hank’s液洗三次,转移至小青霉素瓶中。4、视组织块量加入5—6倍的0.25%胰酶液,37℃中消化20—40分钟,每隔5分钟振荡一次,或用吸管吹打一次,使细胞分离。5、加入3—5ml培养液以终止胰酶消化作用(或加入胰酶抑制剂)。6、静置5—10分钟,使未分散的组织块下沉,取悬液加入到离心管中。7、1000rpm,离心10分钟,弃上清液。8、加入Hank’s液5ml,冲散细胞,再离心一次,弃上清液。9、加入培养液l—2 ml(视细胞量),血球计数板计数。10、将细胞调整到5×105/ml左右,转移至25ml细胞培养瓶中,37℃下培养。上述消化分离的方法是最基本的... 鉴定培养细胞活力有多种方法,fda是主要方法之一,其原理是什么 细胞活力鉴定的方法: 1、相差显微镜观察法 2、FDA染色法 3、伊凡蓝染色法 FDA染色法:是测定原生质体活性的一种方法,即荧光素双醋酸酯染色,FDA本身无荧光,进入原生质体后便产生荧光素,它不能自由进入原生质体膜,因此有活力的细胞便产生荧光。原生质分离,酶,纤维素酶,离析酶。步骤:叶片表面消毒→去除表皮→叶碎片漂浮在含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→培育→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次重悬浮于培养基→除去小的个体,用血球计计数→调整到合适的密度重悬浮于培养基。原生质体的培养:培养基,MS+NAA 2.0ppm+BA 0.5ppm+3%蔗糖+9%甘露醇注意: 1、原生质体分离后,非常脆弱,需要渗透压保护剂的保护直到细胞壁形成。2、针对不同的研究对象,培养基中生长素和细胞分裂素的水平要做适当调整。影响原生质体培养的因素,营养需求(NH4+不能过多)渗压剂,培养密度(105/mL)贮藏条件(通常在黑暗处)。培养方法:液体基质培养法,半液体基质培养法,固体基质培养法,看护培养。固体培养的步骤,原生质体移入培养基→1体积含原生质体的培养基与1体积含琼脂糖 (40℃)的培养基混和→倒转培养皿在25℃下培养→... 谁能给我解释下细胞计数原理和方法,特别是血球计数板的计数计算方法,详细必采…… (1)手工显微镜法 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入血细胞计数池,计数一定体积内的红细胞,经换算求出每升血液中红细胞数量(2)血液分析仪法 利用电阻抗和(或)光散射原理 方法:显微镜计数:将血液标本用等渗稀释液稀释后,充入血细胞计数池,在高倍镜下,计数计数池中央大方格中4个角中方格和中央1个中方格的红细胞数,再换算成每升血液中的红细胞数 能帮助你很高兴 有帮助请点采纳或者好评 祝你开心 细胞直接计数法的几种具体方法 最常用的就是血球计数板计数了吧。台盼蓝染色后,稀释到合适浓度,一般10微升加到平板上,虹吸铺满计数区域后,直接计数就行了可以参考下“血球计数板”词条

#显微镜#计数原理#原生质#固体培养基

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