紫外-可见光分光光度计 原理,基本构造,使用方法,注意事项及应用 一、分光光度计的基本工作原理随着现代科技的不断发展和进步,现代分光光度法的测试手段和方法都在不断改进,但最根本的依据仍然建立在朗伯-比尔定律的基础之上。A=KLC式中:A-为被测物在给定波长的需光吸光度值K-为一系数,称为溶液的吸收系数(与入射光波长及被测物质的特性有关)L-为被测物质的厚度(一般与比色池的厚度有关)C-为被测物质的浓度由上式可以看出,被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比。实际测试时,单色光通过被测物质达到光电接收器,由光电倍增管或光电池转换成光电流,而光电流的强弱决定了吸光度值A的大小。假定通过参比样品的光电流为I。而通过待测样品的光电流为I,则两者之比设定为τ,也称透射比(或以T%表示,称为透过率)。则:τ=I/I。100%朗伯-比尔定律的贡献就是发现了透射比的负对数值(也就是吸光度A)的变化与物质的浓度的变化呈正比关系。即:A=-lgτ或lg(I/I。KCL同时,不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值,这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。基于上述原理,你可以知道无论以往的仪器还是现代的仪器,其最基本的工作要求就是为了能准确获得物质(或称样品)。大学实验室里用的紫外可见分光光度计都是哪个厂家的?什么型号的呢 不知道的紫外型号,但一般有电脑的都有色谱工作站。先配制VC的标准溶液,放进紫外,找工作站中的“光谱扫描”,设置波长范围0~800,或600,然后扫描。做完后就可以得到一张波长-吸光度的标准光谱图。最大吸收峰数据应该软件就给你了。要没有自己找一下最高峰的波长。然后配制一系列标准溶液,在最大吸收峰的波长下一个个测定吸光度,然后以浓度-吸光度绘制标准曲线。在工作站中都可以自动绘制。紫外分光光度法的测定点试样是怎样的? 在薄层板下端2cm处,用微量注射器点10.0ML和20.0ML两个样液点,同时点糖精钠标准溶液10.(V.L、20.0^L两个点,各点间距1.5cm。分光光度计调零的正确详细步骤 分光光度计应如何调零?具体步骤如下:1、首先在使用紫外分光光度计前,用户应先了解仪器的结构和工作原理,以及各个操作旋钮的功能。在未接通电源前,应对仪器进行检查,电源线接线应牢固,通地要良好,各个调节旋钮的起始位置要正确,然后接通电源开关。2、开启电源,指示灯亮,选择开关置于“T”,波长调至测试用波长。仪器预热30 分钟。3、打开试样室盖,调节“0”旋钮,使数字显示为“0。00”盖上试样室盖,将比色皿架处于蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透过率“100%”旋钮,使字显示为“100。0”4、预热后,按(3)连续几次调整“0”和“100%”,紫外分光光度计即可进行测定工作。5、吸光度的测量:按(3)调整仪器的“00.0”和“100%”后,将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使数字显示为“000”,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。向左转|向右转拓展资料分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射。紫外分光光度法测定维生素C的含量 1 仪器与试剂UV-260紫外分光光度计,VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(pH=6)。2 实验操作2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。2.2 样品测定 取VitC20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于VitC50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度A 样。由标准曲线查出样品的浓度C 样品[3]。2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样。VitC含量=C 样品/C 样 或VitC含量=A 样/K×C 样注:K为标准曲线的斜率。3 讨论维生素C的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时,溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时,。常见紫外分光光度计该如何使用,紫外、分光光度计是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的。紫外分光光度计和原子吸收分光光度计单色器位置为什么不同? 紫外:光源、单色器、样品室、检测器 原子:光源、原子化系统、单色器、检测器 因为,紫外可见分光光度计所使用的光源是复合光根据紫外可见分光光度法的原理基朗伯比尔定律。
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