内切酶体系为什么最后加酶? 放心,没有,我个人认为加的顺序没那么重要
DNA限制性内切酶酶切的影响因素 当微量的污染物进入限制性内切酶贮存液中时,会影响其进一步使用,因此在吸取限制性内切酶时,每次都要用新的吸管头。如果采用两种限制性内切酶,必须要注意分别提供各自的最适盐浓度。若两者可用同一缓冲液,则可同时水解。若需要不同的盐浓度,则低盐浓度的限制性内切酶必须首先使用,随后调节盐浓度,再用高盐浓度的限制性内切酶水解。也可在第一个酶切反应完成后,用等体积酚/氯仿抽提,加0.1倍体积3mol/L NaAc和2倍体积无水乙醇,混匀后置-70℃低温冰箱30分钟,离心、干燥并重新溶于缓冲液后进行第二个酶切反应。
fermentas 的pst1 限制性内切酶做酶切时, 一般加的buffer是bufferO,那buffer tango 是作什么用的呢 buffer tango 是fermentas公司的一种较为通用的酶切buffer。fermentas的buffer有buffer O、buffer R、buffer tango、buffer G、buffer B 5种,依照酶的不同而定。http://www.fermentas.com/catalog/re/index.html这里可以查到什么酶可以用什么buffer。
DNA分子的限制性内切酶消化操作流程,限制性内切酶对DNA消化的方案
Xho1和Nde1 50μl双酶切反应体系的配制?? Xho1和Nde1 50μl双酶切反应体系的配制?用Xho1和Nde1对载体质粒和目的片段分别进行双酶切,50μl的酶切体系应该怎样配制?我不知道每种试剂加多少好?。
请问10*PCR buffer与10*taq buffer的区别
为什么我的PCR产物酶切之后什么也没有跑出来?我的PCR(反应体系25ul)扩增后5ul跑电泳显示出目的基因,然后我用剩下中的10ul和1 0 ×buffer 2 μL ,0.1% BSA 2 μL ,Fok I限制性内切酶( 2U / μL ) 1.25μL ,去离子水补足体积至2 0 μL.3 7 ℃水浴反应1 2 h ,2%的琼脂糖凝胶电泳跑完后得到很浅很浅的两个切开的片段,根本就好像没有,
10×buffer K是指什么,生物方面的
DNA限制酶切和琼脂糖凝胶电泳中常说的Marker是什么?还有Loading Dye 在实验中起到什么作用? 1.marker是分子量标准 你要知道电泳时 分子量越小的跑得越快 这样的你的酶切产物电泳后形成的条带 就可以对照marker知道是多大分子量的了2.loading dye 一般用溴酚蓝或二甲苯青 和混在上样缓冲液里 和 样品一起点到点样孔中,电泳过程中 dye也会往前移动。在特定浓度的凝胶里 dye的迁移率会和特定的分子量dna速度一样。目的是为了知道电泳跑到什么时候可以停止,起指示作用的。否则一大块胶 没有指示dye,你也不知道改跑到什么时候 还得跑跑就得紫外照照
双酶切如何进行分部酶切? 双酶切时的顺序一般是根据buffer的兼容性而定。你可以参考takara和NEB的buffer介绍。理论上讲65度,10分钟能使限制性内切酶失活,有些残留可能会对第二个酶有影响,常常。