请教，我做WB，12kd小分子，用pvdf膜好还是NC膜好，湿转的转膜时间最好是多长时间呢？谢谢 我做过18KD的 用的是pvdf膜 转膜200mA 45min
WB实验转膜的湿转和半干转、干转 一般就只有湿转和半干转，据说最近出了一种新的WB的仪器：7分钟完成Western的转印http：//www.ebiotrade.com/newsf/2009-10/20091012145906878.htm也是半干的|湿转是一种。
做WB的时候，用的PVDF膜究竟有没有正反 这个膜的两面是不一样的2113。一面粗糙，一面光滑吧。如5261果这个算正反面的4102话，那么就是1653有正反面的。但是对于WB来说在转膜前是没有正反面之分的。你用粗糙的面贴着胶转膜和光滑的面贴着胶转膜，蛋白都能转到膜上去的。不会因为你膜贴反了而蛋白转膜不成功啥的。转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶，内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
在做WB的时候PVDF膜上出现了一条奇怪的条带？ 这个膜是stripping后做的actin，上了150的ECL，从暗房出来后发现膜上有这么一个红色的条带，正好在43KD处…
WB PVDF膜为什么要用甲醇泡？
WB 抗体能用什么稀释呢？wb抗体用5%的脱脂奶粉（1‰TBST溶液）或者1%的BSA（1‰TBST溶液）配置，可以先让抗体与奶粉或BSA蛋白非特异结合，就不会与PVDF膜上的蛋白结合了。
WB PVDF膜为什么要用甲醇泡？ 其目的是为了活化PDF膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合.
我做WB，12kd小分子，用pvdf膜好还是NC膜好，湿转的转膜时间最好是多长时间呢？
western blot转膜到pvdf膜有分正反面吗 做一下考马斯亮蓝染胶 看是不是全部转完了。照您的描述，应该是转上了，可能是有点过。也可以做一下丽春红染膜，确认看看是不是转上了。同意黑皮地雷的说法，Marker很容易转上的。
在做WB的时候PVDF膜上出现了一条奇怪的条带？ 1：宽粉被污染了！西校的麻辣香锅不敢吃了！
