紫外-可见分光光度法的使用方法 《中华人民共和国药典》2005年版 第一部 附录VA(P附录28):(1)波长 由于环境因素对机械部分的影响,仪器的波长经常会略有变动,因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外,还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm,或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正,钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用,但因来源不同或随着时间的推移会有微小的差别,使用时应注意。(2)吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml,在规定的波长处测定并计算其吸收系数,并与规定的吸收系数比较,应符合表中的规定。波长/nm235(最小)257(最大)313(最小)350(最大)吸收系数的规定值 124.5 144.0 48.62 106.6 吸收系数的许可范围 123.0~126.0 142.8~146.2 47.0~50.3 105.5~108.5(3)杂散光的检查可按下页表的试剂和浓度,配制成水溶液,置1cm。
紫外可见分光光度法有什么应用呢? 紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征,如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较,来确定某些基因的存在。尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法。
紫外可见分光光度法 此方法的原理是根据被测物对特定波长处光吸收的多少来计算其浓度(含量)的,使用前需要教正仪器,避免测量是产生误差。当盖上盖子时,样池中没有样品,所以光应该是完全透过到达另一端被接收,其能量没有减失,所以仪器应该显示100%,当盖子打开时光就不能到达接收端,所以仪器应该显示0
紫外可见分光光度法特点和适用范围
紫外可见分光光度法与课件分光光度计有什么不同
紫外可见分光光度法 此方法的原理是根据被测物对特定波长处光吸收的多少来计算其浓度(含量)的,使用前需要教正仪器,避免测量是产生误差.当盖上盖子时,样池中没有样品,所以光应该是完全透过到达另一端被接收,其能量没有减失,所以仪器应该显示100%,当盖子打开时光就不能到达接收端,所以仪器应该显示0
紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同:(1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。(2)可见分光光度计采用低杂散光,高分辨率的单光束单色器,保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰,所以可用紫外分光。
紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同
紫外-可见分光光度法的基本原理 朗伯比尔定律,稀溶液中物质量浓度于其吸光度成正比1.基本原理单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,即朗伯-比尔定律,这是吸收光谱法定量的理论依据,其关系式如式 3-1:A=ECL 式(3-1)式中 A 为吸收度;E 为吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值;C 为溶液浓度;L 为液层厚度。紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。《中国药典》(2005 年版)有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价。其主要特点为:灵敏度高,可达 10-4 g/ml~10-7 g/ml;准确度高,相对误差为 2%~5%。中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分,在一定的浓度范围内,其溶液的吸收度与浓度符合朗伯-比尔定律,均可用此法进行分析。本法适于大类成分的含量测定,如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。2.定量测定法测定时,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用 1cm 的石英吸收池,在选(规)定的吸收峰波长±2nm 以内测试几个点的吸光度,或由仪器在选定波长附近自动扫描测定,以吸光度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸光度读数,以在 0。