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三点校正紫外分光光度法

2020-07-16知识10
维生素B1 A.三点校正紫外分光光度法 B.高效液相色谱法 C.非水溶液滴定 参考答案:C解析:111~113.中国药典收载的药物含量测定方法。 求紫外分光光度计的校正步骤 校正吸光度常用一很纯物质 一定浓度的溶液为标准,且此溶液的吸光度系数经不同实验室核对,为了使标准液吸光度不受测定波长的微移动而有改变,常选择具有较平滑吸收高峰的物质。同时要求溶液稳定,且在相当的波长范围内吸收度的改变符合Beer-Lambert定律,常用硫酸铜、硫酸铵钻和硝酸钠或钾的溶液。铬酸钾溶液是最常用的标准溶液,此溶液在紫外区和可见区均适用。校正波长或波数可用具有窄吸收带的溶液,滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。如果要求很高的精密度时,可用放电灯泡发射的射线来校正。有的光谱仪其上已装有一个为校正用的灯。苯的蒸气对校正一定范围的波长亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,测其吸收波长,在远紫外区可用氧气的吸收带进行校正。用各种稀土金属的滤光片,可以很快地校正波长,但准确度不如上述方法高。常用含有钬和钕、镨离子的滤光片。扩展资料:日常维护一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等,甚至仪器停止工作,从而影响仪器寿命。... 三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的原理是什么? 因为含维生素A原料中常常2113混有许多杂质,包括异构5261体,氧化降解产物,合4102成中间体,副产物等有关1653物质,且含有稀释用油,这些杂质在紫外区也有吸收,导致在维生素A最大吸收波长处测得的吸光度并不是维生素A独有的吸收,为了消除其他物质引起的误差,所以采用三点校正法。三点波长的选择原则:一点选在维生素A的最大吸收波长处,其他的两点各在这一波长两侧选一点。这两点有两种选择方法,第一种是等波长差法,即最大吸收波长为328nm,左侧一点为316nm,右侧一点为340nm.这是10版药典规定测定维生素A醋酸酯的方法。第二种方法是等吸收比法,即左右两波长处的吸光度相等等于最大吸收波长处吸光度的七分之六。10版药典规定测定维生素A醇时用此方法。 氨苄西林的含量测定方法为() A.三点校正的紫外分光光度法 B.高效液相色谱法 C. 参考答案:B 用紫外分光光度法测定维生素A含量时,为什么采用三点校正法 核酸、核苷酸及其衍物结构嘌呤、嘧啶碱基具共轭双健系统(-C=CC=C),能够强烈吸收250~280nm 波紫外光.核酸(DNA,RNA)紫外吸收值260nm 处.遵照Lambert-Beer 定律,紫外光吸收值变化测定核酸物质含量. 同pH 溶液嘌呤、嘧啶碱基互变异构情况同,紫外吸收光随表现明显差异,摩尔消光系数随同.所,测定核酸物质均应固定pH溶液进行. 核酸摩尔消光系数(或吸收系数),通ε(ρ)表示,即每升含摩尔核酸磷溶液260nm 波处消光值(即光密度,或称光吸收).核酸摩尔消光系数数,依赖于材料前处理、溶液pH 离强度发变化.经典数值(pH=7.0): DNA ε(ρ)=6 000 8 000 RNA ε(ρ)=7 000 10 000 牛胸腺DNA 钠盐溶液(pH=7.0)ε(ρ)=6 600,DNA 含磷量9.2%,含1μg/mL DNA 钠盐溶液光密度0.020.RNA 溶液(pH=7.0)ε(ρ)=7 700~7 800,RNA 含磷量9.5%,含1μg/mL RNA 溶液光密度0.022~0.024.采用紫外光光度测定核酸含量,通规定:260nm 波,浓度1μg/mL DNA 溶液其光密度0.020,浓度1μg/mL RNA 溶液其光密度0.024.,测定未知浓度DNA(RNA)溶液光密度OD260nm,即计算测其核酸含量.该简单、快速、灵敏度高,核酸3μg/mL 含量即测.于含微量蛋白质核苷酸等吸收紫外光物质核酸品,测定误差... 紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/EL A为吸收度;T为透光率2113;E为吸收系数,采用5261的表示方法是(4102E1%1cm),其物理意义为当溶液浓度为1%(g/ml),液层1653厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择... 醋酸地塞米松A、三点校正紫外分光光度法B、高效液相色谱法C、非水溶液滴定法D、溴量法E、Kober反应比 正确答案:B 三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的原理是什么? 因为含维生素A原料中常常混有许多杂质,包括异构体,氧化降解产物,合成中间体,副产物等有关物质,且含有稀释用油,这些杂质在紫外区也有吸收,导致在维生素A最大吸收波长... 用紫外分光光度法测定维生素A含量时,为什么采用三点校正法 因为含维生2113素a原料中常常混有许多5261杂质,包括异构体,氧化降解产物,合成中间体4102,副产物等1653有关物质,且含有稀释用油,这些杂质在紫外区也有吸收,导致在维生素a最大吸收波长处测得的吸光度并不是维生素a独有的吸收,为了消除其他物质引起的误差,所以采用三点校正法。三点波长的选择原则:一点选在维生素a的最大吸收波长处,其他的两点各在这一波长两侧选一点。这两点有两种选择方法,第一种是等波长差法,即最大吸收波长为328nm,左侧一点为316nm,右侧一点为340nm.这是10版药典规定测定维生素a醋酸酯的方法。第二种方法是等吸收比法,即左右两波长处的吸光度相等等于最大吸收波长处吸光度的七分之六。10版药典规定测定维生素a醇时用此方法。 维生素A() A.三点校正的紫外分光光度法 B.高效液相色谱法 C.四氮唑比色法 D 参考答案:A

#紫外可见吸收光谱#色谱法#分光光度法#比色法

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