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紫外分光光度法测量cat 紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告

2020-10-04知识15

紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。。

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原子吸收分光光度法和紫外可见分光光度法有何异同? 一、相同之处:1、它们均是依据样品对入射光的吸收来进行测量的。即经处理后的样品,吸收来自光源发射的某一特征谱线,经过分离后,将剩余的特征谱线进行光电转换,经过记录器记录吸收强度的大小来测定物质含量。2、这两种方法都遵守朗伯比尔定律。3、就组成设备而言,这两种方法均由光源、单色器、吸收池(或原子化器)、检测器这四大部分组成。二、不同之处:1、吸收机理不同原子吸收观察的是构成物质的元素(原子)中的电子在原子轨道中的跃迁,属于原子吸收;紫外可见光吸收观察的是构成物质的分子中的电子在分子轨道中的跃迁,属于分子吸收。2、单色器与吸收器的位置不同在原子吸收光谱仪中,原子化器的使用相当于吸收池,它的位置在单色器之前,而分光光度计中吸收池在单色器之后。3、所需光源不同原子吸收光谱是窄宽带原子吸收光谱,因而它所使用的光源必须是锐线光源(空心极灯等),在测量是,必须将样品原子化,转化成基态原子。紫外可见分光光度法是利用有色化合物对光的吸收来测定的,属于宽带分子吸收光谱,它可以使用连续光源(钨灯、氢灯等)。参考资料来源:—原子吸收分光光度法参考资料来源:—紫外-可见分光光度法

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在紫外可见分光光度法的定量分析中误差来源有几个方面?如何避免? 紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握:本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法;分子吸收光谱与电子跃迁类型,物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线,摩尔吸收系数与吸收系数,吸光度与透光度,偏离朗伯-比尔定律的原因;掌握显色反应条件及光度测量条件的选择;掌握紫外—可见分光光度计的主要部件,各部件的作用及仪器原理,主要类型及特点;掌握差示分光光度法的原理、特点.理物质分子结构与紫外吸收光谱的关系,吸收波长位移与分子结构变化的关系;紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素.了了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径;双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法;紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用.二、基本概念与重点内容A概述1.紫外—可见分光光度法的特点灵敏度与准确度较高;选择性较好;设备简单、操作简便.2.分光光度法的发展过程目视比色法 光电比色法 分光光度法3.分子的紫外—可见吸收光谱分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光,其外层电子跃迁而成,又称分子的电子跃迁光谱.紫外—可见分光光度法是基于物质分子的。

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原子吸收分光光度法和紫外可见分光光度法有何异同? 一、相同之处:1、它们均是依据样品对入射光的吸收来进行测量的。即经处理后的样品,吸收来自光源发射的某一特征谱线,经过分离后,将剩余的特征谱线进行光电转换,经过。

紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:midanshen1紫外分光光度法测定蛋白质含量一、实验目的1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理;2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。二、实验原理1.测蛋白质含量的方法主要有:①测参数法:折射率、相对密度、紫外吸收等;②基于化学反应:定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280nm附近(不同蛋白质略有不同)。在最大吸收波长处,吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差,原因有二:①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一定误差,故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质;②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质,会出现较大干扰。三、仪器与试剂TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、实验步骤1.绘制吸收曲线用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中,用0.9%NaCl。

紫外分光光度法

UV-1700紫外分光光度计测定CAT时为何240nm的波长不能调零,应该怎么办? 有四个因素你可以考虑,240nm不能调满度,如果仪器使用时间较长,可能是氘灯能量不够了,需要更换氘灯;第二,灯室中的反射镜面发雾或脏了,需要更换,切忌不敢擦镜面;第三,紫外区应该用石英比色皿,不能用玻璃比色皿,如果.

分光光度法和紫外分光光度法有何区别? 分光光度2113法是通过测定被测物质在特定波长处或5261一定波长范围内的4102光吸收度,对该物质进行1653定性和定量分析的方法。1.基本原理 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,即朗伯-比尔定律,这是吸收光谱法定量的理论依据,其关系式如式 3-1:A=ECL 式(3-1)式中A 为吸收度;E 为吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值;C 为溶液浓度;L 为液层厚度。紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。《中国药典》(2005 年版)有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价。其主要特点为:灵敏度高,可达 10-4 g/ml~10-7 g/ml;准确度高,相对误差为 2%~5%。中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分,在一定的浓度范围内,其溶液的吸收度与浓度符合朗伯-比尔定律,均可用此法进行分析。本法适于大类成分的含量测定,如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。2.定量测定法 测定时,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用 1cm 的石英吸收池,在选(规)定的吸收峰波长±2nm 以内测试几个点的吸光度,或由仪器在选定波长附近自动扫描测定,。

紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光度法的2113特点52611、与其它光谱分析方法相比,紫外可见4102分光光度法事物仪1653器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。二、紫外可见分光光度法的适用范围紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面,在许多领域更是必备的分析方法,例如食品等行业中的产品质量控制。扩展资料紫外可见分光光度法的注意点:1、准备操作仪器前,需要先查看一下指针仪器在断电的情况下,表面指针是否指向零刻度。如若不是,理应先调零然后才能连接电源。2、在使用的过程中,操作员应该尽量避免对镜灯的触碰,放大器使用过后,一定需要把档位归置到零。3、在操作紫外可见分光光度计时,操作人员需要留意一下机器的干燥剂。4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。参考资料来源:-紫外-可见分光光度法

求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量 1、280nm的光吸收法 用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法 。

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