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紫外分光光度法测维c优势

2020-07-16知识14
紫外分光光度法怎么计算、维生素C 的含量 1.购买VC标准品,配制一系列一定浓度(被测试浓度左右)的标准溶液,测试它们的吸光度/透光率;2.将所得的数据计算得到一条标准曲线,可以通过EXCEL直接拟合;3.测试仪待测VC样品,通过标准曲线计算样品VC浓度. 为什么可用紫外可见分光光度法鉴别维生素c 维生素C具有共轭结构,在稀盐酸溶液中于243nm波长处有最大吸收,百分吸光系数为560,可用于鉴别与含量测定.若在中性或者碱性条件中,最大吸收波长红移至265nm. 紫外分光光度法优缺点 优点是 1灵敏度高 2仪器设备简单,操作简便、快速 3应用广泛缺点是准确度相对不高 紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点? 1、原理不同:(1)紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。(2)荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同:(1)紫外分光光度计主要用于实验室。例如:e799bee5baa6e997aee7ad94e59b9ee7ad9431333431363562鉴定物质:根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。与标准物及标准图谱对照等。(2)荧光分光光度法的灵敏度通常比分光光度法高2?3个数量级。在卫生检验、环境及食品分析、药物分析、生化和临床检测等方面有着广泛的应用。3、所用灯不同:(1)紫外光区通常用氢灯或氘灯。(2)荧光分光光度法通常用钨灯或卤钨灯。4、优缺点:(1)紫外分光光度计高自动化程度,维护方便、操作简便、效率高。(2)荧光分光光度法具有检测灵敏度高、专属性较强和使用简便等特点,常用于微量甚至痕量毒物的定量分析。扩展资料紫外-可见分光光度计的结构与功能:由光源、单色器、吸收池、检测器... 三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的原理是什么? 因为含维生素A原料中常常2113混有许多杂质,包括异构5261体,氧化降解产物,合4102成中间体,副产物等有关1653物质,且含有稀释用油,这些杂质在紫外区也有吸收,导致在维生素A最大吸收波长处测得的吸光度并不是维生素A独有的吸收,为了消除其他物质引起的误差,所以采用三点校正法。三点波长的选择原则:一点选在维生素A的最大吸收波长处,其他的两点各在这一波长两侧选一点。这两点有两种选择方法,第一种是等波长差法,即最大吸收波长为328nm,左侧一点为316nm,右侧一点为340nm.这是10版药典规定测定维生素A醋酸酯的方法。第二种方法是等吸收比法,即左右两波长处的吸光度相等等于最大吸收波长处吸光度的七分之六。10版药典规定测定维生素A醇时用此方法。 紫外分光光度法测定维生素C的含量 1 仪器与试剂 UV-260紫外分光光度计,VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(pH=6)。2 实验操作 2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。2.2 样品测定 取VitC20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于VitC50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度A 样。由标准曲线查出样品的浓度C 样品[3]。2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样。VitC含量=C 样品/C 样 或VitC含量=A 样/K×C 样注:K为标准曲线的斜率。3 讨论维生素C的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时,溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时,... 紫外-可见分光光度法测定 紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光度法的2113特点5261 1、与其它光谱分析方法相比,紫外可见4102分光光度法事物仪1653器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。二、紫外可见分光光度法的适用范围紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面,在许多领域更是必备的分析方法,例如食品等行业中的产品质量控制。扩展资料紫外可见分光光度法的注意点: 1、准备操作仪器前,需要先查看一下指针仪器在断电的情况下,表面指针是否指向零刻度。如若不是,理应先调零然后才能连接电源。2、在使用的过程中,操作员应该尽量避免对镜灯的触碰,放大器使用过后,一定需要把档位归置到零。3、在操作紫外可见分光光度计时,操作人员需要留意一下机器的干燥剂。4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。参考资料来源:百度百科-紫外-可见分光光度法 紫外分光光度法测维c片的含量实验中用的维c对照片用什么? 参考\\x09 32、我很难概括自己的个性.我对那些模式化的人格尤为反感,我只是按我喜欢的做事而已.我不愿随大流,我是写不出那种“啊,我们光荣的大桥”一类的东西的. 紫外分光光度法测定维生素C时,为什么选择稀硫酸溶解维生素C 1 仪器与试剂 UV-260紫外分光光度计,VitC对照品及VitC片(规格:50mg)均由河南某药厂提供,硫酸溶液(pH=6)。2 实验操作 2.1 标准曲线的绘制 精密称取VitC对照品0.05g溶于100ml硫酸溶液,再稀释成一系列不同浓度的对照品溶液(0~14μg/ml),分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。该曲线是经过原点的一条直线,可求出该曲线的斜率。2.2 样品测定 取VitC20片,精密称定,研细,精密称出适量(相当于VitC50mg),置于100ml量瓶中,加硫酸溶液溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液2ml置于另一100ml量瓶中,加硫酸溶液稀释至刻度,测出其吸光度A 样。由标准曲线查出样品的浓度C 样品[3]。2.3 结果计算 根据精密称出的样品的质量、溶解及稀释的体积可求出C 样。VitC含量=C 样品/C 样 或VitC含量=A 样/K×C 样注:K为标准曲线的斜率。3 讨论维生素C的还原能力强而易被氧化,特别是在碱性溶液中更易被氧化。另外在碱性溶液或强酸性溶液中还能进一步发生水解。因此,选择硫酸溶液使成弱酸性。测定时溶液pH的选择:维生素C的紫外最大吸收波长与溶液的pH值有着密切关系。在pH=2.0时,溶液的最大吸收波长在245nm;在pH=12时,...

#标准曲线#分光光度法#紫外可见吸收光谱

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