大肠杆菌的检测方法 多管发酵法。多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法,这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h,而后能产生分解荧光底物—葡萄糖醛酸酶,从而释放出荧光产物,进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵,分离培养试验,利用伊红美蓝培养皿分离,接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵,最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高,成本低,但是检测时间较长,容易受其他条件干扰,进而影响到测定结果的精确度。扩展资料:注意事项: 1、检样时注意无菌操作。2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水,接种时可采用九管法,设置三个梯度,分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一个稀释度的试管应充分混匀。3、每次实验需要有阴性对照。4、使用小倒管培养基配制时,为排净气泡,灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧,灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、 5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0,取出培养基放到冰箱冷却,效果会比较好。参考资料来源:百度百科-大肠杆菌测试片参考资料来源:百度...
细菌的培养与分离 待培养基冷却至60 ℃时,将每只培养皿倒入10至12ml未凝固的固体培养基,置于水平位置上,轻轻晃动使其均匀铺满平皿底部,待凝,使之形成平面。倒置备用。
纯化大肠杆菌的实验方案 1.原理:稀释或划线分离,出现单菌落,根据菌株菌落状态挑取所需菌株. 2.实验材料:待分离菌株,各种药品 3.用具接种环,培养皿,试管,灭菌锅,超净工作台,酒精灯,恒温培养箱 4.步骤:配制大肠杆菌琼脂培养基,灭菌,倒平板,取出待分离菌株,在超净台,挑取划线至培养皿,平板倒置于培养箱培养,37摄氏度,一般2天左右.待长出单菌落,挑取所需菌株至斜面培养基,冰箱保藏. 5.价值:分离纯化或复壮菌种.
百日咳鲍特菌分离培养是什么? 百日咳杆菌为卵圆形短小杆菌,大小为0.5~1.5×0.2~0.5um,属鲍特氏菌属Bordetella,无鞭毛、芽胞。革兰氏染色阴性。用甲苯胺蓝染色可见两极异染颗粒。专性需氧,初次分离培养时营养要求较高,需用马铃薯血液甘油琼脂培养基(即鲍~金氏培养基)才能生长。经37℃2~3天培养后,可见细小、圆形、光滑、凸起、银灰色、不透明的菌落,周围有模糊的溶血环。液体培养呈均匀混浊生长,并有少量粘性沉淀。以分离培养为主,卡他期分离阳性率可达91.5%,而恢复期仅有约26%。标本采用鼻咽试子或咳皿法,在鲍~金工培养平板上孵育,根据菌落形态,涂片染色镜检作出初步诊断。确诊可用分离菌与Ⅰ相免疫血清作血清玻片凝集或免疫荧光染色。
平板划线法的步骤 1.融化培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。2.倒平板:待培养基冷却至50℃左右,按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1),平置,待凝固。倒平板的方法:右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出,试管或瓶口保持对着火焰;然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完,管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝,迅速例入培养基约15m1,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即为平板。3.作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右(平板转动一定角度约60℃),以便充分利用整个平板的面积,而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行,并可避免此两区线条相接触。4.划线操作 (1)挑取他含菌样品:选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量菌种。(2)划A区:将平板倒置于煤气(酒精)灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面,有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上,仍留在煤气...
KIA的实验原理是怎样的? 克氏双糖铁 琼脂(KIA)的原理和使用方法: KIA常用于观察 微生物发酵 葡萄糖和乳糖的能力,可以把 肠杆菌科细菌 和其他科细菌区别出来。KIA成分中含有葡萄糖和乳糖,二者...
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