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做ELISA时要用到TMB显色液,怎么配制?效果怎么样?有人试过没有? 四甲基联苯胺h2o2

2020-10-03知识8

四甲基联苯胺的应用 TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为450nm。ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用

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简述影响试剂盒检测的因素包括哪些 标本的影响溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),ELISA试剂盒在洗涤过程中。

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()不属于商品养护措施() A.安排储存场所 B.严格验收 C.加强仓库温湿度控制 参考答案:D

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请教ELISA 显色底物DAB,OPD,ABTS,TMBS有什么区别 HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染料,通过反应可生成有色的氧化型染料(D)。酶促反应的过程如下:HRPDH2+H2O2—→D+2H2O供氢。

酶反映中如何由米氏常数和转化率,初始浓度推算最大反映速率 【实验原理】1913年,Michaelis和Menten运用酶反应过程中形成中间络合物的原理,首先提出了底物浓度和酶促反应速率的关系式,即著名的米氏方程:????SKSVvmmax????。

过氧化物酶染色四甲基联苯胺法的原理是什么? 粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶(POX),POX能分解H2O2而释放出新生氧,使四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝,后者与亚硝基铁氰化钠结合,再进一步氧化形成。

做ELISA时要用到TMB显色液,怎么配制?效果怎么样?有人试过没有?配方一:底物显色A液:醋酸钠13.6g,柠檬酸1.6g,30%双氧水0.3ml,蒸馏水加至500ml.底物显色B液:乙二胺四乙酸二钠。

#速率常数

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