如何利用dilution plate的方法分选单克隆细胞 预先对96孔板除第一排之外的所有孔加含15%胎牛血清的细胞培养液，0.1ml/孔，并放于细胞培养箱中温育，然后胰酶消化稳定表达GFP的细胞，细胞液稀释至密度为1000cell/ml的单细胞悬浮液，上述细胞液接种于96孔板的第一排，0.2ml/孔，从中吸取0.1ml细胞溶液接种于第二排，混合后，从第二排中吸取0.1ml接种于第三排…，一直到第八排，最后一排都丢弃0.1ml细胞液，操作示意图见下图。一般来说，每一列都会有某个孔中只有1~2个细胞。3.方法3。我的改进之处：我在显微镜下观察，标记孔中小于10个细胞的孔，然后在显微镜下用记号笔在皿底把单个荧光细胞圈住，然后在操净台里用灭过菌底牙签将圈外的细胞戳死，这样留在孔中的就是单克隆了，通过这样的，我一共获得了6株单克隆。但需注意的是：时间不能超过30min，否则细胞极容易死亡。解决操作时间长的方法：拿一个96板，在里面随便种一些细胞，然后用牙签练习，我练了5～6次后非常熟练了培养液：最好是含15％的胎牛血清，加大营养，有利于细胞生长；另外一种方法是对还没有变黄的细胞液进行过滤，过滤后的培养含有很多生长因子，可以作为单克隆的培养液。4.方法4。我曾经帮同事做过挑单克隆，直接将倒置显微镜搬到操净台内。
如何优雅地吃癌细胞？ 作为一个学过基本高中生物的学渣，我们知道普通细胞进行培养会有接触抑制，工作繁琐，还有原代培养和什么…
支原体检测试剂盒的使用方法是什么 支原体检测试剂盒操作步骤：贴壁细胞：1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中，接种密度为1-2×104。同时，接种正常无支原体感染的同种细胞，作为阴性对照。2.5天后，先吸去培养液，再加入1ml的固定液，静置20min，3.吸去固定液，晾干。4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置15-20min或室温静置20～30min。5.吸去Hoechst 33258工作液，加入2ml灭菌超纯水洗涤三次，直接风干。风干后加入一滴封片液，并以盖玻片覆盖。6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。悬浮细胞：1.收集需检测的细胞，1500rpm，5min。2.将收集的细胞涂片于载玻片上，再加1ml的固定液，静置20min。3.吸去固定液，晾干。4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置15～20min或室温静置20～30min。5.吸去Hoechst 33258工作液，用无菌水洗涤玻片3次，直接风干。风干后加入一滴封固液，并以盖玻片覆盖。6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。结果判断（参考）：阴性：仅见。
T25细胞培养瓶是什么瓶？ T25 细胞培养 瓶指的是细胞生长面积为25cm2的培养瓶。细胞培养瓶就是用来培养细胞的。根据材质可以分为玻璃的和塑料的，底部形状有正方形、长方形、三角形等，根据瓶子。
关于菌落总数测定 楼主你该问的不问，不该问的却问了。早有耳闻新版国家标准有误，也不知道哪个家伙审的稿，那么白痴的公式说明居然都会放出来当标准，真是被同行笑话。公式没错。错的是n1和n2代表的是平板数，而不是菌落数！计算样品的总菌落数或者单位体积内的菌落数，无非就是抽取一部分样品液体适当稀释使其长出便于计数的菌落。然后把计数得到的菌落的总数除以涂平板用掉的体积，就是稀释液中的菌体密度，再乘以稀释的倍数，不就是原来样品的菌体密度嘛。原理就是这么简单。这里所谓的稀释因子就是换算到样品密度所需要乘的系数。举例：1g样品用10ml水充分悬浮，将悬浮液稀释了100倍后发现菌落疏密适宜，且之后的稀释1000也是适宜，这两个稀释度各有3个平板可用于计数，总共计数得660个菌落，每次涂布用200μL。因为你稀释1000倍的液体是将100倍的稀释液再稀释十倍所得，所以1000倍稀释液涂的十个板相当于是100倍稀释液的一个板。100倍稀释液的菌体密度就是660个除以（3×0.2+0.3×0.2）ml，既然100倍稀释液的密度知道了，那么稀释前的就是乘上100，提取0.2的公因子，得500，也就是稀释的倍数，就是所谓的稀释因子。原来样品的悬浮液的菌体密度是660个除以（3+0.3）ml再乘上500的。
怎样将细胞从培养瓶中种到96孔板
怎么样测定细胞培养液中细胞密度 你养的是悬浮细胞？嗯，我们一般用血球板计数法，就是充分混匀培养液后，取出1~10ml，离心，用适量pbs重悬，后悬滴于血球板计数，数对角线四个中格里一共多少，除以四，除以0.01ml，再除以原液体积就得出细胞密度了.我说的可能不准确，你去“血球板计数”会有详细的实验方法.另外，如果你养的细胞在一定波长下有吸收峰，就测OD也可以，同样要充分悬起后立即测，因为细胞会沉底.1OD对应多大的细胞浓度是可以查到的，如果你养的是查不到的稀有细胞，建议先血球板计数，自己算，以后就省事了.
96孔板一般接种多少间充质干细胞
如何理解培养细胞生命期和培养细胞一代生存期 1)，培养细胞的生命期细胞在体外培养中持续增殖和生长的时间。2)，组织培养细胞一代生存期针对特定生长空间，细胞从接种到分离再培养的一段时间
