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限制性内切酶及其应用

2020-10-02知识2

基因工程中主要的工具酶有哪几种,它们的作用是什么 基因工程工2113具酶主要包括限制酶、聚合酶、连接酶5261、修饰4102酶和核酸酶五大类,具体解释如下:1、1653DNA限制性内切酶生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息;2、连接酶它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键;3、聚合酶系专司生物催化合成脱氧核糖核酸和核糖核酸的一类酶的统称;4、核酸酶核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相应的DNA和RNA,核酸酶S1可降解单链DNA和RNA,用量增大也可降解双链核酸,它可用于切去ds-cDNA合成中产生的发夹环;5、修饰酶体内有些酶可在其他酶的作用下,将酶的结构进行共价修饰,使该酶活性发生改变,这种调节称为共价修饰调节。扩展资料:工具酶的相关应用—多重放大技术:为了获得更高的检测灵敏度,将多种信号放大技术结合起来使用是一种有效途径。基于切刻内切酶与DNA聚合酶组合作用的等温循环链置换放大技术,是近年来被广泛使用的一种工具酶组合信号放大技术。该技术的基本原理是。

 限制性内切酶及其应用

限制性内切酶的应用有哪些方面 限制酶的应用:1.DNA重组2.分子杂交受体体段DNA3.DNA 序列分析4.制备DNA指针5.基因定位6.DNA甲基化碱基的识别和切割7.组建新质粒等等.

 限制性内切酶及其应用

限制性内切酶有几类?各有什么特点 根据限制2113酶的结构,辅因子的需求切位与作用5261方式,可将限制4102酶分为三种类型,分别是第一型(1653Type I)、第二型(Type Ⅱ)及第三型(Type Ⅲ)。第一型限制酶同时具有修饰(modification)及识别切割(restriction)的作用;另有识别(recognize)DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位(cleavage site)距离识别位(recognition site)可达数千个碱基之远。例如:EcoB、EcoK。第二型限制酶只具有识别切割的作用,修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回文序列(palindrome sequence);所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。例如:EcoRI、HindⅢ。第三型限制酶与第一型限制酶类似,同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列,切割位与识别序列约距24-26个碱基对。例如:HinfⅢ。扩展资料限制性内切酶分类性质根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大;反应过程中除需Mg2+外,还需要S-腺苷-L甲硫氨酸、ATP;在DNA分子上没有特异性的酶解片断,这是I、Ⅱ类酶之间最明显的。

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