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限制性内切酶的作用 二型限制性内切酶用途

2020-10-01知识9

三种限制性核酸内切酶的作用 首先介绍三种限制性内切酶的特点I 型限制性内切酶,能识别专一的核苷酸顺序,并在识别点附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链,但是切割的核苷酸顺序没有专一性,是随机的.代表EcoB、EcoKII 型限制性内切酶,能识别专一.

限制性内切酶的作用 二型限制性内切酶用途

限制性内切酶的作用 所谓限制性内切酶就是能够识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶.在构建重组载体的时候,需用限制性内切酶切割目的基因和载体,再用连接酶将两者连接起来.

限制性内切酶的作用 二型限制性内切酶用途

基因工程这一节中,限制性内切酶是只存在于原核细胞吗?基因工程中这个酶是在体外发挥作用吗? 30多年前,当人们在对噬菌体的宿主特异性的限制-修饰现象进行研究时,首次发现了限制性内切酶。细菌可以抵御新病毒的入侵,而这种\"限制\"病毒生存的办法则可归功于细胞内部可摧毁外源DNA的限制性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌的EcoR I和EcoR II,以及来源于Heamophilus influenzae的Hind II和Hind III。这些酶可在特定位点切开DNA,产生可体外连接的基因片段。研究者很快发现内切酶是研究限制性内切酶的主要功能是保护细菌不受噬菌体的感染,这一观点已被人们广泛接受。它们作为微生物免疫 机制的一部分行使其功能。当一个没有限制性内切酶的细菌被病毒感染时,大部分病毒颗粒都能成功地进行感染。然而一个有限制性内切酶的同种细菌被成功感染的比率显著下降。出现更多的限制性内切酶将会起到多重保护作用;而一个拥有4到5种各自独立的限制性内切酶将会使细胞坚不可摧。限制性内切酶常常伴随一到两种修饰酶(甲基化酶)出现。后者的作用是保护细胞自身的DNA不被限制性内切酶破坏。修饰酶识别的位点与相应的限制性内切酶相同,但只甲基化每条链中的一个碱基,而不是切开DNA链。限制性内切酶识别位点处的甲基基团伸入到双螺旋 的大沟中去,阻碍了。

限制性内切酶的作用 二型限制性内切酶用途

限制性内切酶的作用特点是什么 特异性,一种核酸内切酶只作用于一种特定的核甘酸序列.

为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA? 迄今为止,基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的,它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。细菌中限制酶之所以不切断自身DNA,是因为微生物在。

限制性内切酶有几类?各有什么特点 根据限制2113酶的结构,辅因子的需求切位与作用5261方式,可将限制4102酶分为三种类型,分别是第一型(1653Type I)、第二型(Type Ⅱ)及第三型(Type Ⅲ)。第一型限制酶同时具有修饰(modification)及识别切割(restriction)的作用;另有识别(recognize)DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位(cleavage site)距离识别位(recognition site)可达数千个碱基之远。例如:EcoB、EcoK。第二型限制酶只具有识别切割的作用,修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回文序列(palindrome sequence);所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。例如:EcoRI、HindⅢ。第三型限制酶与第一型限制酶类似,同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列,切割位与识别序列约距24-26个碱基对。例如:HinfⅢ。扩展资料限制性内切酶分类性质根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大;反应过程中除需Mg2+外,还需要S-腺苷-L甲硫氨酸、ATP;在DNA分子上没有特异性的酶解片断,这是I、Ⅱ类酶之间最明显的。

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