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细菌内毒素检查法(定量检测)之光度测定法 定量法测细菌内毒素

2020-10-01知识7

细菌内毒素检测方法,目前国内一个是凝胶法,另一个是光度法,多数是以光度法测定,可得到一个定量的结果,这样的结果也较可靠。内毒素很多人较陌生,甚至有些临床医生,。

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如何测定人体某部分皮肤上的细菌数 取样,细菌内毒素检查,鲎试验,基于检测样品中内毒素与鲎试剂之间的生物化学反应,在 37 ℃ 温度下反应 60 分钟后终止反应 浊度法 浊度法采用专用仪器在适当波长范围内。

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什么是热原?简述热原的性质,热原的污染途径及去除热原的方法 热原(pyrogen)系指能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。它包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。这里所指的“热原”,主要是指细菌性热原,是某些细菌的代谢产物、细菌尸体及内毒素。致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌的产物,其次是革兰阳性杆菌类,革兰阳性球菌则较弱,霉菌、酵母菌、甚至病毒也能产生热原。发热机理热原—白细胞(WBC)—吞噬—白细胞崩解,释放内源性致热原—作用于体温调节中枢—产热增加、散热减少—体温上升。检查方法热原检查(家兔法)由于家兔对热原的反应与人基本相似,家兔法为各国药典规定的检查热原的法定方法。《中国药典》2005年版规定的热原检查法系将一定剂量的供试品,静脉注入家兔体内,在规定时间内,观察家兔体温升高的情况,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的状况、试验室条件和操作的规范性。家兔法检测内毒素的灵敏度为0.001μg/ml,试验结果接近人体真实情况,但操作繁琐费时,不能用于注射剂生产过程中的质量监控,且不适用于放射性药物、肿瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂。细菌内毒素检查法(鲎试剂法)细菌内毒素检查法系利用鲎试剂。

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用鲎试剂法测定内毒素的原理是什么?用此法替家法测内毒素?北京欣惠泽奥北京的鲎试剂销售品种最多,销量最大的单位 鲎试剂按实验方法可分为:凝胶法、动态浊度法鲎试剂、。

热原的检查方法 由于家兔对热原的反应与人基本相似,家兔法为各国药典规定的检查热原的法定方法。《中国药典》2005年版规定的热原检查法系将一定剂量的供试品,静脉注入家兔体内,在规定时间内,观察家兔体温升高的情况,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的状况、试验室条件和操作的规范性。家兔法检测内毒素的灵敏度为0.001μg/ml,试验结果接近人体真实情况,但操作繁琐费时,不能用于注射剂生产过程中的质量监控,且不适用于放射性药物、肿瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂。细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法.细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。细菌内毒素检查包括凝胶法和光度测定法两种方法,前者利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素,后者包括浊度法和显色基质法,系分别利用鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化及产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少来测定内毒素。鲎试剂法检查内毒素的灵敏度为0.0001μg/ml,比家兔法灵敏10倍,操作简单易行,试验费用低,结果迅速可靠,适用于注射剂生产。

寻找最新英国药典有关细菌内毒素检验方法~ 各国药典细菌内毒素检查法的比较 阳 怡 白兆平 云南省红十字会医院药剂科(昆明 650021)1968年美国科学家Dr.Levin和Bang建立了鲎试验法。此后世界各国对鲎试剂的生产和应用。

细菌内毒素中什么是定量法 目前,国内外广泛应用且检测技术比较成熟的细菌内毒素定量检查法主要有以下四种。1.1 凝胶法 是目前最常用的细菌内毒素检查法。即在10mm×75mm的小试管内,加入待检样品和鲎试剂各0.1ml混合,37℃、60 min保温反应后,180°倒转,根据凝胶形成的情况(凝胶是否坚实)作为判定指标的一种半定量法。此法操作简单,经济而且不需要专用仪器。凝胶法既可限量检测内毒素,也可在0.03 EU?ml-1以上进行半定量测定。1.2 显色基质法(合成基质法、显色合成基质法,Chromoge-nic Technique)系根据细菌内毒素与LAL(或TAL)试剂中的C系反应所激活的凝固酶,使用人工合成的鲎三肽(即与PNA相连的显色基质如BOC-LEU-GLY-ARG-PNA等)作为显色基质,水解鲎三肽中的精氨酸肽链,通过测量反应液中释放出游离的对硝基苯胺(PNA)的吸光值而进行定量的一种检测方法。该法需要专用仪器。目前主要用于微量血浆、血清、全血、骨髓液及尿、乳汁等的临床检验以及家禽、实验动物、人工脏器的安全性评估等方面。根据测定原理的不同分为终点显色法和动态显色法。1.2.1 终点显色法(EndopointColorimetric Assay)系根据在一定时间内游离出的PNA的量与细菌内毒素浓度成正比例关系进行测定的一种分析方法。PNA(黄色)的。

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#细菌内毒素#鲎试剂#家兔

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