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碱性蛋白质纯化 蛋白质分离纯化的四种方法

2020-10-01知识16

蛋白质的纯化实验 不发生电泳现象,蛋白质粒子带负电荷,在电场中向负极移动,蛋白质粒子带正电荷;在等电点偏碱性溶液中,在电场中向正极移动,可以将蛋白质进行分离纯化。这种现象称为蛋白质电泳(Electrophoresis).蛋白质的分离纯化的一般原则①高回收率②高纯度③高活性④方便与快捷⑤经济蛋白质的分离纯化的一般步骤①前处理②粗分③细分④结晶蛋白质沉淀方法①盐析法②等电点沉淀法③有机溶剂沉淀法④非离子型聚合物沉淀法⑤聚电解质沉淀法⑥高价金属离子沉淀法2根据分子大小不同的纯化方法①透析与超过滤②密度梯度离心③凝胶过滤3根据电荷不同的纯化方法在不同的pH环境下1。利用蛋白质的电泳现象。蛋白质在等电点pH条件下。在等电点偏酸性溶液中,蛋白质的电学性质不同

碱性蛋白质纯化 蛋白质分离纯化的四种方法

蛋白质分离纯化的四种方法 论述题:请说出可用于蛋白质分离纯化的四种方法及原理?很急,望帮忙,谢谢!1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的。

碱性蛋白质纯化 蛋白质分离纯化的四种方法

蛋白质的纯化实验? 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中,如盐析,有机溶剂提取,层析和结晶等;二是将混合物置于单一物相中,通过物理力场的作用使各组分分配于来同区域而达到分离目的,如电泳,超速离心,超滤等。在所有这些方法的应用中必须注意保存生物大分子的完整性,防止酸、硷、高温,剧烈机械作用而导致所提物质生物活性的丧失。蛋白质的制备一般分为以下四个阶段:选择材料和预处理,细胞的破碎及细胞器的分离,提取和纯化,浓细、干燥和保存。微生物、植物和动物都可做为制备蛋白质的原材料,所选用的材料主要依据实验目的来确定。对于微生物,应注意它的生长期,在微生物的对数生长期,酶和核酸的含量较高,可以获得高产量,以微生物为材料时有两种情况:(1)得用微生物菌体分泌到培养基中的代谢产物和胞外酶等;(2)利用菌体含有的生化物质,如蛋白质、核酸和胞内酶等。植物材料必须经过去壳。

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