制作感受态细胞时摇菌要加抗生素吗 pMD18T连一段多长的DNA，连接DNA用量及时间？转化到哪个感受态细胞中？Amp抗性平板长菌情况如何？仔细观察以上问题，考虑是否转化不成功。培养基的体积是否小于试管体积的1/5？摇菌转数是否达到250rpm，试管要斜放？是否观察过菌体生长过程（2-6小时生长情况），是否有噬菌体污染？如果转化成功，则需要考虑菌体生长环境。
我做克隆连接转化总是不长菌，可能是什么问题 可能导致转化失败的原因太多了.如果确认板子和感受态没有问题，一般就是ligation可能出错，建议做平行实验：ligation，control，blankL就是你的连接转化，铺在抗
求助！刚刚开始做分子实验，但是转化的时候老不长菌，求大神帮我分析一下 我的质粒大概5000bp，目的基因大概1400bp，PCR条带大小在5000-7000之间，应该是正确的，双酶切验证的时候一个5000，一个1000多，抗性问题？我的抗性是氨苄，你是说我的氨苄。
氯化钙制备感受态细胞的方法常用在细菌上，能不能用在酵母菌上啊？如果不能的话，转化酵母菌用什么办法？
大肠杆菌感受态细胞的制备和转化中对照组不该长菌的平板长出了菌落是为什么：建议你咨询下大夫？
感受态细菌转化后在氨苄板上培养12个小时，板上长出菌了，挑菌后摇菌
做感受态转化实验的时候，摇菌这一步摇得很浓有关系吗 有啊，没有转化到的细菌太多了，容易出假阳性的克隆。所以你克隆长出来以后做个鉴定吧
