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mtt接种密度过低 MTT实验的OD值很高,用酶标仪检测时有的值已经超出范围,显示“OUT”字样,这是什么原因?做了两次都这样

2020-10-01知识12

做流式的时候开始我是用MTT的细胞密度和铺板时间来决定加药时间让细胞长到多满的时候开始加药? 博凌科为生物科技-为你作流式最好用六空板作,种板时细胞数目不要少于1106,24小时细胞贴壁后再加药,48小时候检测才能保证作流式时的细胞数量.另外,作流式和做 MTT药量不是简单的换算关系,要根据预实验结果来进行.

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悬浮细胞做MTT时接种密度多少为宜呢 如果细胞生长良好25000-30000就可以,你的接种密度不算太高 我养的悬浮细胞在密度为40000的时候,测出的OD值太高

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MTT实验的OD值很高,用酶标仪检测时有的值已经超出范围,显示“OUT”字样,这是什么原因?做了两次都这样 没遇到过。看看MTT的浓度,接种的细胞数,药物孵育时间,处理细胞的药物对MTT实验有无干扰

mtt接种密度过低 MTT实验的OD值很高,用酶标仪检测时有的值已经超出范围,显示“OUT”字样,这是什么原因?做了两次都这样

做MTT时细胞的接种密度对实验结果有什么影响呢? 你的解释是有道理的。处于对数生长期的细胞对药物是最敏感的,而对数生长期的细胞就是似满非满,长得太满的细胞肯定已过对数生长期,你要对接种的细胞浓度摸索一下,细胞。

做悬浮细胞的MTT,用酸化异丙醇溶解结晶测的吸光度都非常低,什么原因呢?我做的是悬浮细胞的MTT,因为细胞趋向凋亡,接种密度比较高,有三种,分别是10000个/孔、100000个/孔、500000个/孔,加10微升 MTT培养4小时后,用酸化异丙醇溶解结晶,但是测的吸光度都非常低,只有0.005左右,请问是什么原因呢?

MTT法操作步骤 (1)单细胞悬液接种于96孔培养板;103-104细胞/孔,每孔培养基总量200微升(96孔培养板每孔容积370微升),37℃、5%CO2培养箱中培养一段时间(根据实验目的决定培养时间。

做悬浮细胞的MTT,用酸化异丙醇溶解结晶测的吸光度都非常低,什么原因呢? 博凌科为解答:我也遇到过类似问题,但OD值也没那么低,差不多0.2。开始也以为是MTT的问题,重新配置之后,仍然低,因此改用20%SDS-50%DMF做裂解 液,OD值就高了,没有进一步试验是不是别的原因,现在一直用这种裂解液代替酸化异丙醇了。配置方法可参看下面文献:文献中用的是14%SDS,效果差不 多。请参考:改良MTT法检测HePG22 细胞增殖的研究

做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少? 博凌科为我觉得细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平.比如我做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于比较.后来我换用 10000/ml,结果就很好.当然细胞数也不能太多,这其实取决于你细胞的生长速度,生长快的细胞,可接种浓度低点.这主要是使细胞增殖率不致受处理因素之外的其他因素影响,比 如接触抑制,营养竞争.总之,做MTT时细胞数应较低,目的就是为了排除其他因素的影响,以使每孔细胞生长情况尽可能地反映出处理因素的影响.细胞接种的浓度和你的实验目的、要求、细胞种类、处理因素的特殊要求都有关系.没有简单的,每孔接种多少的一个标准.当然,可以用楼上建议的浓度开 始摸索.同时,注意肿瘤细胞核正常细胞的生长数度也不一样,前者生长快,后者慢,细胞数的量也有讲究.到底多少合适,得根据你的实验具体要求来摸索.我做 b16转染时,因为脂质体要求细胞融合度为30%-50%,曾经没孔接种过300-500个细胞,效果非常好,

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